[发明专利]用作治疗性疫苗的自体癌症肿瘤相关染色体外环状DNA

权利要求书

1.一种制备自体治疗性癌症疫苗的方法，所述方法包括：

-从肿瘤细胞中提取总DNA含量；

-富集肿瘤相关染色体外环状DNA(ecDNA)；

-将所述肿瘤相关染色体外环状DNA(ecDNA)与选自缓冲液、盐、防腐剂、载体、佐剂和皂苷的至少一种药学上可接受的成分组合。

2.一种制备自体治疗性癌症疫苗的方法，所述方法包括：

-从血液、尿液、血清或血浆中提取循环游离DNA；

-富集肿瘤相关染色体外环状DNA(ecDNA)；

-将所述肿瘤相关染色体外环状DNA(ecDNA)与选自缓冲液、盐、防腐剂、载体、佐剂和皂苷的至少一种药学上可接受的成分组合。

3.根据权利要求1或2所述的方法，所述方法还包括扩增所富集的ecDNA的步骤。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，所述方法还包括：

-所富集的ecDNA的DNA测序；

-RNA分子的RNA测序并识别从肿瘤相关ecDNA转录的RNA序列；

-将至少一种表达RNA的肿瘤相关ecDNA与至少一种药学上可接受的成分组合。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中，所富集的ecDNA的至少一部分被结合至选自聚合物颗粒、脂质颗粒和脂质体颗粒的纳米颗粒，或基于肽的递送载体，或者选自金或钨微粒的微粒。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，所述方法还包括将所富集的ecDNA递送至离体的自体抗原呈递细胞的步骤。

7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述抗原呈递细胞是树突状细胞。

8.一种用作针对癌症的治疗性疫苗的自体肿瘤相关染色体外环状DNA(ecDNA)，其中，所述ecDNA通过酶处理从样品中富集。

9.根据权利要求8所述的用作治疗性疫苗的自体肿瘤相关ecDNA，其中，所述癌症选自包括前列腺癌、乳腺癌、结肠癌、肺癌、肝癌、胰腺癌、皮肤癌和脑癌的组。

10.根据权利要求8或9所述的用作疫苗的自体肿瘤相关ecDNA，所述用作疫苗的自体肿瘤相关ecDNA还包含药学上可接受的佐剂或赋形剂。

11.一种在治疗癌症的方法中使用的治疗性癌症疫苗，所述治疗性癌症疫苗包括：

-至少一种染色体外环状DNA(ecDNA)；

-选自缓冲剂、盐、防腐剂、载体、佐剂和皂苷的至少一种药学上可接受的成分；

其中，所述至少一种染色体外环状DNA(ecDNA)包含肿瘤相关ecDNA。

12.一种在治疗癌症的方法中使用的治疗性癌症疫苗，所述治疗性癌症疫苗包括：

-合成核酸，所述合成核酸能够从ecDNA衍生的RNA序列获得；

-选自缓冲剂、盐、防腐剂、载体、佐剂和皂苷的至少一种药学上可接受的成分；

其中，所述合成核酸包含肿瘤相关染色体外环状DNA(ecDNA)，所述ecDNA包含具有引发免疫反应的可能性的至少一种遗传改变。

13.根据权利要求11或12所述的治疗性癌症疫苗，其中，所述自体治疗性癌症疫苗与淋巴系统接触，优选地与至少一个淋巴结或淋巴结附近接触。

14.一种在治疗癌症的方法中使用的治疗性癌症疫苗，所述治疗性癌症疫苗包含权利要求8至10中任一项所述的自体肿瘤相关(ecDNA)，并且能够通过权利要求1至7中任一项所述的方法获得。