[发明专利]具有改进的生产和治疗特征的细胞群

说明书

本发明涉及制备用于治疗用途的细胞和组合物的改进方法。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2019年1月29日提交的美国临时专利申请第62/798,469号的权益和于2019年3月5日提交的美国临时专利申请第62/814,285号的权益。

发明领域

本发明涉及开发用于治疗用途的细胞的领域，并且更具体地，涉及通过控制细胞在加工期间分裂和分化的速率来提高药学上最期望的细胞的产量。

发明背景

用于治疗的细胞通常在体内或体外诱导的阶段中发育。例如，响应于抗原或用抗CD3和抗CD28抗体进行的刺激，幼稚T细胞启动它们发育成T记忆性干细胞，随后是中枢记忆性T细胞、效应记忆性细胞，并且最后是短寿命的效应T细胞的过程(参见Gattinoni，等人；Blood 121(4):567-568(2013))。已知能够影响该过程的因子包括IL-7、IL-15和TWS119(促进幼稚T细胞向T记忆性干细胞的进展)和IL-2(促进幼稚T细胞发育成效应记忆性细胞)(同上(Id.))。

除自然过程以外，收集血液还启动一系列被充分记载的事件。除了内在或外在血小板激活之后的经典凝血级联以外，血流动力学平衡的改变(相关的血细胞比容、血浆浓度、抗凝剂类型和存在度(presence)等)也会启动细胞响应，以尝试恢复止血。更通常地，已经记载了过度接触、扰动和所产生的细胞信号传递诱导样品内细胞激活、无反应性甚至强直信号传递(T细胞：B细胞相互作用的频率增加)。因此，为疗法而收集的细胞被收集和加工行为以影响其响应治疗的能力的方式改变。

细胞通常还必须进行遗传工程化，以实现其作为治疗剂的全部潜力。在这种情况下，细胞通常将需要分裂才能成功地整合为其提供有治疗价值属性的遗传插入物。例如，CAR-T细胞必须进行工程化，以使其能够有效地靶向肿瘤细胞。

优选用于制备CAR T细胞的T细胞类型是相对未分化的细胞，诸如T记忆性细胞和/或，更优选地，T记忆性干细胞。获得这些细胞的高产量将取决于两个方面，即消除细胞制备物(preparations)中可能存在的将细胞导向不需要的末端的因子和添加将细胞导向其最期望治疗状态的因子。还应该认识到，随着T细胞倍增次数增加，不太期望的细胞的比例也会增加。因此，控制倍增次数很重要。

发明概述

本发明基于此概念，即具有治疗上有价值的表型的遗传工程化细胞的产量可以通过采取控制细胞在加工期间被激活、分裂和分化的程度的步骤进行提高。

本发明涉及一种从未终末分化的靶细胞产生遗传工程化靶细胞群的方法。通常地，靶细胞应该是治疗相关的(即具有治疗用途的细胞)直径大于3.5μm的有核细胞。靶细胞可以是：a)白细胞，包括中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞(包括B细胞、T细胞和自然杀伤细胞)、单核细胞、巨噬细胞、肥大细胞、树突状细胞；b)干细胞，包括i)发育成白细胞的干细胞，诸如具有CD34和/或CD38标志物的干细胞和发育成白细胞谱系阴性细胞(leukocyte lineage negative cells)的干细胞，和ii)发育成除白细胞以外的细胞的干细胞；和c)红系前体细胞。特别优选的靶细胞包括幼稚T细胞和T记忆性干细胞。