[发明专利]伤寒型肠道沙门氏菌的经修饰的菌株

权利要求书

1.一种肠道沙门氏菌伤寒血清型(Salmonella enterica serovar Typhi)的减毒活菌株，其中所述菌株被修饰以表达肠道沙门氏菌甲型副伤寒血清型(Salmonella entericaserovar Paratyphi A)的脂多糖O2 O-抗原和鞭毛蛋白。

2.权利要求1的减毒活菌株，其中所述菌株的修饰包括天然rfbE基因被失活之处。

3.权利要求1或2的减毒活菌株，其中所述菌株的修饰包括天然rfbE基因被缺失之处。

4.权利要求1-3的减毒活菌株，其中所述天然rfbE基因是通过插入DNA的间隔区而失活，优选地其中所述DNA的间隔区为大肠杆菌基因wbdR的顺反子。

5.权利要求1-4的减毒活菌株，其中所得到的脂多糖O2 O-抗原的长度至少与肠道沙门氏菌伤寒血清型的脂多糖O9 O-抗原的长度相等。

6.权利要求1-5的减毒活菌株，其中所述菌株的天然fliC基因用肠道沙门氏菌甲型副伤寒血清型的fliC基因置换，或其中所述被置换的fliC基因反式表达，使得所赋予的血清型从Hd血清型变为Ha血清型。

7.权利要求1-6的减毒活菌株，其中所述菌株被修饰以含有功能性fepE基因，使得产生长O-抗原链，优选地其中所述O-抗原链的长度为三糖主链的100个重复单元和/或其中所述菌株被进一步修饰以组成型表达gtrC，或其中所述gtrC基因反式表达，和/或其中所述菌株被进一步修饰以包含在吞噬体诱导的启动子控制下的tviA基因的额外拷贝。

8.一种包含权利要求1-7的减毒活菌株的疫苗，其用于增强针对肠道沙门氏菌甲型副伤寒血清型的免疫原性，并用于治疗或预防伤寒肠热病和沙门氏菌病。

9.根据权利要求1-8的疫苗，其中所述菌株为ZH9或ZH9PA。

10.根据权利要求9的疫苗，其中ZH9或ZH9PA为所述疫苗的单一组分，或其中ZH9和ZH9PA以组合形式存在。

11.一种肠道沙门氏菌伤寒血清型的减毒活菌株，其中所述菌株被修饰以表达肠道沙门氏菌乙型副伤寒血清型(Salmonella enterica serovar Paratyphi B)和肠道沙门氏菌鼠伤寒血清型(Salmonella enterica serovar Typhimurium)的脂多糖O4 O-抗原和鞭毛蛋白。

12.权利要求11的减毒活菌株，其中所述菌株的修饰包括用肠道沙门氏菌乙型副伤寒血清型和/或肠道沙门氏菌鼠伤寒血清型的rfbJ基因替代天然rfbS基因，或其中所述菌株的修饰包括用肠道沙门氏菌乙型副伤寒血清型和/或肠道沙门氏菌鼠伤寒血清型的rfbJ基因的同时反式表达将天然rfbS基因失活。

13.权利要求11或12的减毒活菌株，其中所述菌株的天然fliC基因被肠道沙门氏菌乙型副伤寒血清型和/或肠道沙门氏菌鼠伤寒血清型的fliC基因替代，或其中被置换的fliC基因反式表达，使得所赋予的血清型从Hd血清型分别变为Hb和Hi血清型。

14.权利要求11-13的减毒活菌株，其中将所述肠道沙门氏菌乙型副伤寒血清型和肠道沙门氏菌鼠伤寒血清型的fljBA基因座插入肠道沙门氏菌伤寒血清型的染色体中或反式表达。

15.权利要求11-13的减毒活菌株，其中对fljBA操纵子的天然启动子侧翼的所述hix位点，或hin重组酶基因进行修饰，以实现组成型表达。

16.权利要求11-15的减毒活菌株，其中所述菌株根据权利要求7进行进一步修饰。

17.一种包含权利要求11-16的减毒活菌株的疫苗，其用于增强针对肠道沙门氏菌乙型副伤寒血清型和/或肠道沙门氏菌鼠伤寒血清型的免疫原性，并用于治疗或预防伤寒肠热病和沙门氏菌病。