[发明专利]一种由硫化叶菌细胞培养物生产包含古细菌脂质的组合物的生产方法

权利要求书

1.一种由硫化叶菌细胞培养物生产包含古细菌脂质的组合物的方法，包括

(1)在75～85℃和0.025～0.035/h的生长速率的条件下培养硫化叶菌细胞培养物，并从古细菌培养物中提取古细菌脂质，以获得用于口服缓释疗法的组合物，或

(2)在75～85℃和0.005～0.015/h的生长速率的条件下培养硫化叶菌细胞培养物，并从所述古细菌培养物中提取所述古细菌脂质，以获得用于口服急性疗法的组合物。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述硫化叶菌细胞培养物是嗜酸热硫化叶菌细胞的培养物。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中用于口服缓释疗法的组合物包含比例为1:5～1:7，特别是1:5.5～1:6.5的二己糖-双植烷双甘油四醚(2Hex-Cal)与磷脂酰肌醇-双植烷甘油二醚(PI-Arc)。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其中用于口服急性疗法的组合物包含比例为1:2～1:4，尤其是1:2.5～1:3.5的二己糖-双植烷双甘油四醚(2Hex-Cal)与磷脂酰肌醇-双植烷甘油二醚(PI-Arc)。

5.根据权利要求1～4中任一项所述的方法，其中所述细胞在培养后进行均质化，优选通过均质化处理，特别是高压均质化处理或超声处理。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述均质化的细胞与缓冲液混合，优选与乙酸铵缓冲液混合，特别是与100～200mM的乙酸铵缓冲液混合。

7.根据权利要求1～6中任一项所述的方法，其中所述古细菌脂质通过从包含细胞和/或均质化细胞的水相提取到有机相中，优选通过提取到氯仿/甲醇有机相中，并将有机相与水相分离获得。

8.根据权利要求7的方法，其中所述古细菌脂质通过蒸发有机相，优选通过将有机相蒸发至干获得。

9.根据权利要求1～8中任一项所述的方法，其中所述获得的古细菌脂质与活性药物组合，优选与药学上可接受的载体组合，以获得包含古细菌脂质和活性药物的组合物。

10.根据权利要求1～9中任一项所述的方法，其中所述古细菌脂质通过超临界流体萃取，特别是用超临界CO₂萃取获得。

11.一种根据权利要求1～10中任一项所述的方法获得的包含古细菌脂质的组合物。

12.优选根据权利要求11所述的包含古细菌脂质的组合物，其中所述组合物包含比例为1:5～1:7或1:2～1:4的二己糖-双植烷双甘油四醚(2Hex-Cal)与磷脂酰肌醇-双植烷甘油二醚(PI-Arc)。

13.根据权利要求11或12所述的组合物，其中所述组合物进一步包含药物，优选包含用于人类医疗用途的药物，特别是需要获得授权才能将产品作为欧盟或美国发行的医药产品投放于市场的药物。

14.根据权利要求11～13中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含四醚脂质体，所述四醚脂质体包含至少5％w/w，优选至少10％w/w的PI-Arc和至少50％w/w的2Hex-Cal(w/w％表示占总脂质的质量百分比)。

15.一种由古细菌细胞培养物生产包含古细菌脂质的组合物的方法，包括在控制条件下培养古细菌细胞培养物，并从古细菌培养物中提取古细菌脂质，以获得包含古细菌脂质的组合物。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述控制条件包括pH、生长速率、温度和处理模式。