[发明专利]用于改进的免疫疗法的组合基因靶标

权利要求书

1.一种修饰的免疫效应细胞，其包含能够降低选自SOCS1、PTPN2和ZC3H12A的至少两种内源靶基因的表达和/或功能的基因调控系统，其中所述降低的至少两种内源靶基因的表达和/或功能增强所述免疫效应细胞的效应子功能。

2.如权利要求1所述的修饰的免疫效应细胞，其中所述至少两种靶基因是SOCS1和PTPN2。

3.如权利要求1所述的修饰的免疫效应细胞，其中所述至少两种靶基因是SOCS1和ZC3H12A。

4.如权利要求1所述的修饰的免疫效应细胞，其中所述至少两种靶基因是PTPN2和ZC3H12A。

5.如权利要求1-4中任一项所述的修饰的免疫效应细胞，其中所述基因调控系统还能够降低CBLB的表达和/或功能。

6.如权利要求1-5中任一项所述的修饰的免疫效应细胞，其中所述基因调控系统包含(i)核酸分子；(ii)酶蛋白；或(iii)核酸分子和酶蛋白。

7.如权利要求6所述的修饰的免疫效应细胞，其中所述基因调控系统包含选自siRNA、shRNA、微小RNA(miR)、微小RNA拮抗剂或反义RNA的核酸分子。

8.如权利要求6所述的修饰的免疫效应细胞，其中所述基因调控系统包含酶蛋白，并且其中所述酶蛋白已被工程化以特异性结合所述内源基因中的一种或多种中的靶序列。

9.如权利要求8所述的修饰的免疫效应细胞，其中所述蛋白质是转录激活物样效应子核酸酶(TALEN)、锌指核酸酶或大范围核酸酶。

10.如权利要求6所述的修饰的免疫效应细胞，其中所述基因调控系统包含核酸分子和酶蛋白，其中所述核酸分子是指导RNA(gRNA)分子，并且所述酶蛋白是Cas蛋白或Cas直系同源物。

11.如权利要求10所述的修饰的免疫效应细胞，其中所述Cas蛋白是Cas9蛋白。

12.如权利要求10所述的修饰的免疫效应细胞，其中所述Cas蛋白是包含两个酶活性结构域的野生型Cas蛋白，并且能够诱导双链DNA断裂。

13.如权利要求10所述的修饰的免疫效应细胞，其中所述Cas蛋白是包含一个酶活性结构域的Cas切口酶突变体，并且能够诱导单链DNA断裂。

14.如权利要求10所述的修饰的免疫效应细胞，其中所述Cas蛋白是失活的Cas蛋白(dCas)，并与能够调节所述一种或多种内源靶基因的表达的异源蛋白结合。

15.如权利要求14所述的修饰的免疫效应细胞，其中所述异源蛋白选自由MAX相互作用蛋白1(MXI1)、Krüppel相关盒(KRAB)结构域、甲基-CpG结合蛋白2(MECP2)和四个串联的mSin3结构域(SID4X)组成的组。

16.如权利要求10-15中任一项所述的修饰的免疫效应细胞，其中所述至少两种内源基因是SOCS1和PTPN2，并且其中所述基因调控系统包含至少一种靶向SOCS1的gRNA分子和至少一种靶向PTPN2的gRNA分子，所述靶向SOCS1的gRNA分子包含与表3和4中所示的一组基因组坐标中的任一个所限定的核酸序列互补的靶向结构域序列，所述靶向PTPN2的gRNA分子包含与表5和6中所示的一组基因组坐标中的任一个所限定的核酸序列互补的靶向结构域序列。