[发明专利]微滴操作方法

权利要求书

1.控制微滴的大小和/或保持或优化其中发生的酶促或化学反应的方法，所述微滴的平均体积在0.5飞升至10纳升的范围内，所述微滴包含至少一种生物成分和第一水性介质，所述第一水性介质具有小于1的水活度a_w1，所述方法的特征在于将微滴保持在与水不混溶的载体流体中的步骤，所述载体流体还包括次级液滴，所述次级液滴包含第二水性介质，且所述次级液滴的平均体积小于所述微滴平均体积的25％、高达并包括最大4飞升，并且其中每单位体积总量中载体流体与微滴总体积的体积比大于2:1。

2.根据权利要求1的方法，其用于操作微滴的内容物的大小和/或化学或酶促反应性，所述微滴的平均体积在0.5飞升至10纳升范围内；所述微滴包含至少一种生物成分和不含生物细胞的第一水性介质，所述第一水性介质的水活度a_w1小于1，所述方法的特征在于将微滴保持在与水不混溶的载体流体中的步骤，所述载体流体进一步包括次级液滴，所述次级液滴包含第二水性介质，且所述次级液滴的平均体积小于微滴平均体积的25％、高达并包括最大0.5飞升，并且其中每单位体积总量中载体流体与微滴总体积的体积比大于2:1。

3.根据权利要求1的方法，其用于控制微滴中的化学或酶促反应性和/或微滴大小，所述微滴的平均体积在4飞升至10纳升范围内；所述微滴包含至少一种生物细胞和第一水性介质，所述第一水性介质的水活度a_w1小于1，所述方法的特征在于将微滴保持在与水不混溶的载体流体中的步骤，所述载体流体进一步包括次级液滴，所述次级液滴包含第二水性介质，且所述次级液滴的平均体积小于微滴平均体积的25％、高达并包括最大4飞升，并且其中每单位体积总量中载体流体与微滴总体积的体积比大于2:1。

4.根据权利要求1至3中任一项的方法，其特征在于次级液滴具有大于a_w1的水活度a_w2。

5.根据权利要求1至3中任一项的方法，其特征在于次级液滴具有小于a_w1的水活度a_w2。

6.根据权利要求1至3中任一项的方法，其特征在于次级液滴具有与a_w1相同的水活度a_w2。

7.根据权利要求1至3中任一项的方法，其特征在于次级液滴具有水活度a_w2，并且a_w1和a_w2独立地在0.9至1的范围内。

8.根据权利要求4的方法，其特征在于第二水性介质的离子强度在第一水性介质的离子强度的1至5倍的范围内。

9.根据权利要求5的方法，其特征在于第一介质的离子强度在第二水性介质的离子强度的1至5倍的范围内。

10.根据权利要求1-3中任一项的方法，其特征在于次级液滴的平均体积小于微滴的平均体积的10％。

11.根据权利要求1-3中任一项的方法，其特征在于第一和第二水性介质中的至少一种进一步包含甘油。

12.根据权利要求1-3中任一项的方法，其特征在于所述生物成分选自源自靶核酸的单一三磷酸核苷、源自细胞的DNA或RNA的寡核苷酸、酶或细胞。

13.根据权利要求12的方法，其特征在于第一和/或第二水性介质是缓冲液。

14.根据权利要求3的方法，其中所述方法还包括使包含在微滴内的一种或多种细胞类型细胞增殖，所述微滴的平均体积在4飞升至10纳升范围内且包含含水生长培养基，所述方法包括在合适的环境条件下温育液滴内的细胞并随后检测每个液滴内的细胞数量。