[发明专利]自动化生物制造系统、设备和方法

权利要求书

1.生产纯化的目标蛋白质的方法，其中，所述方法包括以下步骤：

(a)在允许细胞将蛋白质分泌至液体培养基中的条件下，在包含液体培养基的一个以上一次性灌注生物反应器中培养哺乳动物细胞至少10天的生产培养期；在生产培养期间，周期性地或连续地将新鲜的无菌液体培养基添加至一个以上灌注生物反应器中，在每个灌注生物反应器中保持恒定的培养体积，这与从每个灌注生物反应器中作为渗透物或细胞渗出物体积连续或周期性取出的培养物体积直接相关；移除体积的渗透物从一个以上一次性灌注生物反应器自动且流体地输送至一次性缓冲容器，然后进入第一色谱系统，由此使蛋白质集中在蛋白质分离物级分中。

2.生产纯化的目标蛋白质的方法，其中，所述方法包括以下步骤：

(a)在允许细胞将蛋白质分泌至液体培养基中的条件下，在包含液体培养基的一个以上一次性灌注生物反应器中培养哺乳动物细胞至少10天的生产培养期；在生产培养期间，周期性地或连续地将新鲜的无菌液体培养基添加至一个以上灌注生物反应器中，与多种不同的浓缩培养基组分溶液和水性稀释剂同时进行混合，在每个灌注生物反应器中保持恒定的培养体积，这与从每个灌注生物反应器中作为渗透物或细胞渗出物体积连续或周期性取出的培养物体积直接相关；移除体积的渗透物从一个以上一次性灌注生物反应器自动且流体地输送至一次性缓冲容器，然后进入第一色谱系统，由此使蛋白质集中在蛋白质分离物级分中。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述方法还包括以下步骤：

(b)将蛋白质分离物级分转移至低pH或去污剂病毒灭活系统和视需要的中和系统，得到包含蛋白质的病毒灭活产物池。

4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述方法还包括以下步骤：

(c)将病毒灭活产物池引入第二色谱系统，得到包含蛋白质的纯化产物池；

(d)将包含蛋白质的纯化产物池转移至可选的第三色谱系统和/或病毒过滤系统，得到包含蛋白质的无病毒过滤物；以及

(e)将无病毒过滤物转移至超滤/渗滤系统中，得到包含纯化的目标蛋白质的组合物。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述目标蛋白质是重组蛋白质。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其中，所述目标蛋白质是治疗性蛋白质。

7.根据权利要求1、2或4所述的方法，其中，第一色谱系统、第二色谱系统、第三色谱系统、低pH或去污剂病毒灭活系统、中和系统、病毒过滤系统或超滤/渗滤系统中的一个以上包括一次性组件。

8.根据权利要求1或2所述的方法，其中，在2个、3个、4个、5个或6个一次性灌注生物反应器中培养哺乳动物细胞。

9.根据权利要求1或2所述的方法，其中，一个以上一次性生物反应器可包含约50L至约4000L体积的液体培养基。

10.根据权利要求2所述的方法，其中，通过将多种不同的浓缩培养基组分溶液以相对于彼此固定的比例直接注入灌注生物反应器中，将新鲜的无菌液体培养基添加至一个以上灌注生物反应器中，同时还以相对于多种不同的浓缩组分溶液的不同比例添加水性稀释剂，在每个灌注生物反应器中保持恒定的培养体积。

11.根据权利要求2所述的方法，其中，通过将多种不同的浓缩培养基组分溶液和水性稀释剂以相对于彼此固定的比例直接注入灌注生物反应器中，将新鲜的无菌液体培养基添加至一个以上灌注生物反应器中，在每个灌注生物反应器中保持恒定的培养体积。

12.根据权利要求2所述的方法，其中，通过将多种不同的浓缩培养基组分溶液和水性稀释剂以相对于彼此固定的比例注入混合室中，将新鲜的无菌液体培养基添加至一个以上灌注生物反应器中；所述新鲜的无菌液体培养基在添加至每个灌注生物反应器之前同时进行混合，保持恒定的培养体积。