[发明专利]使用射频多路复用激发数据对荧光成像进行光谱解混

权利要求书

1.一种用于分选样本的多个细胞的方法，所述方法包括：

在硬件处理器的控制下：

利用具有多个不同光学频率的激光束来照射包括多个细胞的样本中的细胞，以引发与所述细胞相关的多个荧光团的荧光发射；

检测不同波长处的荧光发射，以获得与时间空间中多个荧光团对应的多个通道的荧光强度数据；

从所述多个通道的荧光强度数据生成在频率空间中包括复数值的多个像素的多个原始图像；

针对多个通道的荧光强度数据中的每个，使用一个或更多个通道相位调整，来从多个原始图像中生成在频率空间中包括复数值的多个像素的多个相位调整图像；

在所述多个相位调整图像的对应像素的复数值上使用解混矩阵，来从多个相位调整图像中生成在频率空间中包括复数值的多个像素的多个解混图像；

基于多个荧光团中的每个的性质，从多个解混图像中生成在频率空间中包括复数值或实数值的多个像素的多个相位校正图像；以及

基于所述多个相位校正图像来确定针对细胞的分选决定。

2.一种用于分选样本的多个细胞的方法，所述方法包括：

在硬件处理器的控制下：

利用具有多个不同光学频率的激光束来照射包括多个细胞的样本中的细胞，以引发与所述细胞相关的多个荧光团的荧光发射；

检测不同波长处的荧光发射，以获得与时间空间中多个荧光团相对应的多个通道的荧光强度数据；

从所述多个通道的荧光强度数据生成在频率空间中包括复数值的多个原始图像；

在多个原始图像的对应复数值上使用解混矩阵，来从多个原始图像生

成在频率空间中包括复数值或实数值的多个解混图像；以及

基于所述多个解混图像来确定针对细胞的分选决定。

3.一种用于分选样本的多个细胞的方法，所述方法包括：

在硬件处理器的控制下：

从与包括多个细胞的样本中的细胞相关的多个荧光团，接收不同波长处荧光发射的多个通道的荧光强度数据，所述多个通道的荧光强度数据对应于时间空间中的多个荧光团，其中，在利用具有多个不同光学频率的激光束来照射所述细胞之后引发所述荧光发射；

从所述多个通道的荧光强度数据生成在频率空间中包括复数值的多个原始图像；

在多个原始图像的对应复数值上使用解混矩阵，来从多个原始图像中生成在频率空间中包括复数值或实数值的多个解混图像；以及

基于所述多个解混图像来确定针对细胞的分选决定。

4.根据权利要求3所述的方法，包括：利用激光束来照射细胞，以在时间空间中引发所述多个通道的荧光强度数据的荧光发射。

5.根据权利要求2至4中任一项所述的方法，其中，所述多个原始图像包括多个原始图像的复数值的多个像素。

6.根据权利要求2至5中任一项所述的方法，包括：针对所述多个通道的荧光强度数据中的每个，使用一个或更多个通道相位调整，来从多个原始图像生成在频率空间中包括复数值的多个相位调整图像，其中，生成多个解混图像包括：在多个相位调整图像的对应复数值上使用解混矩阵，来从所述多个相位调整图像生成多个解混图像。

7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述多个相位调整图像包括多个相位调整图像的复数值的多个像素。

8.根据权利要求2至7中任一项所述的方法，包括：基于多个荧光团中的每个的性质，从多个解混图像生成在频率空间中包括复数值的多个相位校正图像，其中，确定所述分选决定包括：基于所述多个相位校正图像来确定针对细胞的分选决定。

9.根据权利要求8所述的方法，其中，所述多个相位校正图像包括多个相位校正图像的复数值的多个像素。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其中，生成多个原始图像包括：使用时间-频率空间变换，来从所述多个通道的荧光强度数据生成在频率空间中的多个原始图像。