[发明专利]用于离子束成像的组合物和试剂

说明书

组合物包含以多于一个游离标记单元为特征的标记剂，其中每个标记单元包含至少一个用于与生物分子共价键合的缀合基团、至少一个金属螯合基团和被至少一个金属螯合基团螯合的金属离子，其中组合物中水的重量百分比为10％或更少。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2019年1月3日提交的美国临时专利申请第62/788,118号的优先权，其全部内容通过引用并入本文。

技术领域

本公开内容涉及使用离子束扫描生物样品以及制备用于扫描的样品。

背景

免疫组化方法已被用于使生物样品(诸如肿瘤组织活检)中的蛋白表达可视化。这样的方法通常包括将样品暴露于与荧光部分或产生有色色素的酶报告物偶联的抗体。标记的样品的光谱图像分析产生可用于评估蛋白表达水平和共表达事件的信息。使用这样的方法可以分析多种样品，包括福尔马林固定、石蜡包埋的组织切片。

概述

生物样品的离子束扫描和成像是用于提供对样品的蛋白表达、核酸和其他结构组分之间的功能关系的洞察的强大技术。关于个体细胞和细胞区室内共调节和共表达的信息可用于阐明疾病机制和评价药物和其他治疗方法。

某些离子束成像方法包括将样品暴露于来自离子源的初级离子束。初级离子从被检测的样品产生次级离子。通常，特定类型的次级离子与样品中的特定分析物相关，从而可以选择性且定量地测量每种类型的分析物。在一些方法中，产生的次级离子是具有特定质荷比的质量标签。

在将样品暴露于初级离子束之前，可以用合适的质量标签制备样品。通常，合适的制备方法包括将特定质量标签与样品中的特定分析物(例如，生物分子和/或结构部分)结合。当产生对应于质量标签的次级离子时，单独类型的次级离子(具有特定的质荷比)被归于对应质量标签所结合的特定分析物。

本公开内容特征在于离子束成像之前用于样品制备的试剂以及使用该试剂制备样品的方法。通常，该试剂包括标记剂以及质量标签，所述标记剂包含质量标签的一个或更多个结合部位，所述质量标签结合一个或更多个结合部位中的至少一些。可以使用各种不同的质量标签。在一些实施方案中，该质量标签可以包括金属原子或离子，并且特别地，镧系金属原子或离子。通过使用对应于金属原子或离子的质量标签，从样品产生的次级离子是具有特定质荷比的金属离子。这样的次级离子易于检测和区别。

在第一方面，本公开内容特征在于包含以多于一个游离标记单元为特征的标记剂的组合物，其中每个标记单元包含至少一个用于与生物分子共价键合的缀合基团、至少一个金属螯合基团和被至少一个金属螯合基团螯合的金属离子，其中组合物中水的重量百分比为10％或更少。

组合物的实施方案可以包括以下特征中的任何一种或更多种。

每个游离标记单元可以是由多于一个缀合单体单元形成的寡聚单元。每个寡聚单元可以包含至少n个缀合单体单元，例如，其中n是3或更多或者5或更多。每个寡聚单元可以包括相同数目的缀合单体单元。

游离寡聚单元中的至少一个可以包含第一数目的缀合单体单元，并且游离寡聚单元中的至少一个可以包含不同于第一数目的缀合单体单元的第二数目的缀合单体单元。游离寡聚单元中的至少一个可以包含一个或更多个第一单体单元和一个或更多个不同于第一单体单元的第二单体单元。在游离寡聚单元中的至少一个中，第一单体单元与第二单体单元的比可以在50:1和1:50之间。

在游离寡聚单元中的至少一个中，第一单体单元和第二单体单元可以交替缀合。在游离寡聚单元中的至少一个中，至少两个第一单体单元可以彼此缀合。游离寡聚单元中的至少一个可以包含一个或更多个第一单体单元和一个或更多个不同于第一单体单元和第二单体单元的第三单体单元。