[发明专利]从微生物细胞组合物中获得脂质的方法

权利要求书

1.一种从包含微生物细胞的组合物中获得脂质的方法，所述方法包括：

(a)通过在约9至约11的pH下在搅动下将所述组合物加热至约60℃至约95℃的温度达约1小时至约6小时的时间段来处理所述包含微生物细胞的组合物；

(b)将所述经处理的微生物细胞分离成基本上由浓缩微生物细胞组合物组成的轻相和基本上由发酵培养基和水性材料组成的重相；

(c)通过添加碱将所述浓缩微生物细胞组合物的pH调节至约10至约12的pH，并保持约10至约12的pH至少1小时；

(d)通过添加酸将(c)的所述组合物的pH调节至约3至约6，并保持约3至约6的pH至少0.5小时；

(e)任选地重复步骤(c)和(d)，直到所述组合物被充分破乳；

(f)从所述经破乳的裂解细胞组合物中分离出所述脂质；以及

(g)回收所述脂质。

2.根据权利要求1所述的方法，其中(a)包括将所述组合物加热至约80℃至约95℃的温度。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中(c)和(d)包括将所述组合物加热至约70℃至约90℃。

4.根据任何前述权利要求所述的方法，其中在(c)之前将一种或多种能够破坏所述微生物细胞的细胞壁的酶添加至所述浓缩微生物细胞组合物中达足以裂解所述微生物细胞的时间。

5.根据任何前述权利要求所述的方法，其中在(c)之前、在(c)之后、在(d)之前、在(d)之后或它们的组合使所述组合物经受一个或多个温度冲击循环。

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述温度冲击包括将温度从约80-90℃调节至约4-20℃并回到约80-90℃。

7.根据任何前述权利要求所述的方法，其中(b)、(c)和/或(d)还包括添加按所述浓缩微生物细胞组合物的重量计约0.05％至约20％的量的盐。

8.根据任何前述权利要求所述的方法，其中(a)还包括机械破碎所述细胞，其中所述机械破碎导致少于5％的所述细胞的裂解。

9.根据任何前述权利要求所述的方法，其中(a)的所述细胞是未洗涤的。

10.根据任何前述权利要求所述的方法，其中(a)的所述细胞被包含在发酵液中。

11.根据任何前述权利要求所述的方法，其中(f)包含对所述经破乳的裂解细胞组合物进行离心或膜过滤。

12.根据任何前述权利要求所述的方法，其中在(b)之前将pH调节至7.5-8.5。

13.根据任何前述权利要求所述的方法，其中在(b)之前将温度调节至70-80℃。

14.根据任何前述权利要求所述的方法，其中所述脂质包含多不饱和脂肪酸。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述多不饱和脂肪酸选自ω-3脂肪酸、ω-6脂肪酸，以及它们的混合物。

16.根据权利要求14或15所述的方法，其中所述多不饱和脂肪酸选自二十二碳六烯酸(DHA)、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳五烯酸(DPA)、花生四烯酸(ARA)、γ-亚麻酸(GLA)、二均-γ-亚麻酸(DGLA)、十八碳四烯酸(SDA)，以及它们的混合物。

17.根据权利要求16所述的方法，其中所述多不饱和脂肪酸是二十二碳六烯酸(DHA)。

18.根据权利要求16所述的方法，其中所述多不饱和脂肪酸是二十碳五烯酸(EPA)。