[发明专利]在受试者中用于确定应激状态和/或用于评估应激反应水平的方法

说明书

本发明涉及一种方法，用于确定受试者的应激状态、用于评估受试者的应激反应水平、用于预测干预方案在受试者中的功效、用于监测干预方案在受试者中的功效和/或用于确定用于受试者的干预方案，所述方法包括在所述受试者的样本中检测选自由26个基因组成的组的至少4个基因的表达和/或定量表达水平的步骤，本发明还涉及一种试剂盒及其用途，所述试剂盒包括用于扩增和/或检测所述基因表达的工具。

技术领域

本发明涉及一种方法，用于确定受试者的应激状态、用于评估受试者的应激反应水平、用于预测干预方案在受试者中的功效、用于监测干预方案在受试者中的功效和/或用于确定用于受试者的干预方案，所述方法包括在所述受试者的样本中检测选自由26个基因组成的组的至少4个基因的表达和/或定量表达水平的步骤，本发明还涉及一种试剂盒及其用途，所述试剂盒包括用于扩增和/或检测所述基因表达的工具。

背景技术

正如Hans Selye在其1956年的开创性著作“The stress of life”(版本：McGraw-Hill Book Company)中所提出的，应激通常被定义为“一种由特定综合征表现出来的状态，其由生物系统内所有非特异性诱导的变化组成”。具体地，应激是一种生理状态，其中个体暴露于环境中生物或非生物因素的改变(称为应激源或挑战)后，会启动反应以维持体内平衡。这种应激反应首先会引起这些个体的行为、生物和物理变化，所属变化最终导致耐受和适应。如果适应没有完成或失败，可能会超过耐受阈值，导致生物功能改变。个体无法承受应激或应对环境挑战可能会导致许多不利后果，从不适到死亡。

特别是在动物生产中，已经确定了范围广泛的非生物应激源，例如社会交往或粗暴对待、常见的农场实践(如阉割、去角、剪牙、修蹄、断奶逼迫)、喂养不当、暴露于不利的气候条件、锻炼、工作和运输。饲养期间发生的应激源暴露可能会影响动物舒适感、生产力和性能的保持。动物生长参数(如体重增加、饲料摄取、饲料转化率、死亡率和发病率)传统上用于表征动物的性能，但它们并不具体反映动物的应激状态。因此，必须能够通过使用灵敏而强大的诊断工具来确定受试者(人或动物)的应激状态。

之前已经提出了一些选自以下的应激生物标志物：循环激素(例如皮质醇、ACTH、肾上腺素、催产素、加压素)、分解代谢产物(例如氧化脂质的积累(例如丙二醛、异前列腺素、氢过氧化物、氧化LDL、己酰赖氨酸)或氧化蛋白质的积累(例如硝基酪氨酸、羰基化蛋白质))、炎症生物标志物(例如过氧化氢、髓过氧化物酶)、氧化DNA的生物标志物(例如8-羟基-2'-脱氧鸟苷)、或细胞内抗氧化系统活性的量度(例如超氧化物歧化酶、过氧还蛋白、硫氧还蛋白、谷氧还蛋白、谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽)。在此基础上，还开发了试剂盒，例如Oxyscale诊断试剂盒(如专利EP2017623中所述)或QIAGEN氧化应激RT²分析仪PCR阵列(RT² profiler PCR array)，它们依赖于对大量基因表达的测量。

多种基因也被描述为参与特定的应激细胞模型，但本领域技术人员公知，体外获得的结果很少可在体内转化，并且无法从这些研究中推断出这些基因中的哪些(如果有)可用于确定受试者(人类或动物)的应激状态。

总的来说，所有这些生物标志物都显示出一些局限性，特别是因为它们通常是短暂的，并且特定于应激源的类型和/或所考虑的物种。事实上，这些生物标志物不容易在物种和/或应激条件之间转移，并且尚未确定令人满意的通用生物标志物。

在这方面，发明人完全出乎意料地发现，从二十六个基因的列表中选择的至少四个基因的表达的检测和/或定量对于规避这些问题是有用的。这些基因代表了与应激源类型和所考虑的物种无关的生物标志物。

发明内容