[发明专利]AAV介导的基因疗法恢复耳畸蛋白基因

权利要求书

1.一种允许在内毛细胞中表达全长耳畸蛋白多肽或其功能片段的载体系统，其用于治疗患有DFNB9耳聋的患者、或在具有DFNB9突变的患者中预防DFNB9耳聋，其中所述患者是具有发育的和成熟的听觉系统的人，例如新生儿、幼儿、儿童、青少年或成人。

2.根据权利要求1所述用途的载体系统，其中所述耳畸蛋白多肽具有序列SEQ ID NO:1。

3.根据权利要求1所述用途的载体系统，其包含至少一种AAV颗粒，所述AAV颗粒包含编码全长耳畸蛋白多肽或其功能片段的多核苷酸。

4.根据权利要求1所述用途的载体系统，其包含至少两种AAV颗粒，它们中的每一种包含含有部分编码序列的多核苷酸，对于一种AAV颗粒，所述部分编码序列编码i)耳畸蛋白多肽或其功能片段的N末端部分，对于另一种AAV颗粒，所述部分编码序列编码ii)耳畸蛋白多肽或其功能片段的C末端部分。

5.根据权利要求1所述用途的载体系统，其包含至少两种AAV颗粒，每种所述AAV颗粒包含：

a)第一多核苷酸，其包含在所述多核苷酸的每个末端的反向末端重复，以及在所述反向末端重复之间从5'至3’的合适的启动子、之后是含有耳畸蛋白基因的N末端部分的部分编码序列、以及剪接供体位点，或

b)第二多核苷酸，其包含在所述多核苷酸的每个末端的反向末端重复，以及在所述反向末端重复之间的从5'至3’的剪接受体位点、含有耳畸蛋白基因的C末端部分的部分编码序列，之后任选的聚腺苷酸化序列，

其中所述第一和第二多核苷酸还含有引起重组的序列，其位于所述第一多核苷酸的剪接供体位点之后，所述第二多核苷酸的剪接受体位点之前，以及

其中当第一和第二多核苷酸结合时其中的编码序列编码全长耳畸蛋白多肽、或其功能片段。

6.根据权利要求5所述用途的载体系统，其中所述耳畸蛋白基因具有序列SEQ ID NO:2。

7.根据权利要求5所述用途的载体系统，其中所述耳畸蛋白基因的N末端部分是SEQ IDNO:3，以及所述耳畸蛋白基因的C末端部分是SEQ ID NO:4。

8.根据权利要求3所述用途的载体系统，其中所述AAV颗粒是AAV2血清型。

9.根据权利要求1所述用途的载体系统，其包含AAV2颗粒，其中通过将酪氨酸氨基酸残基取代成苯丙氨酸氨基酸残基对衣壳进行修饰。

10.根据权利要求1所述用途的载体系统，其中所述人患者在语言习得之后被诊断患有DFNB9耳聋。

11.根据权利要求1所述用途的载体系统，其中所述患者是患有由热敏突变诱导的DFNB9耳聋的青少年或成人，所述热敏突变优选选自：P.Q994VfsX6、P.I515T、p.G541S、PR1607W、p.E1804del。

12.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至9中任一项所述的载体系统以及药学上可接受的载剂，所述药物组合物用于治疗患有DFNB9耳聋的患者、或在具有DFNB9突变的患者中预防DFNB9耳聋，其中所述患者是具有发育的和成熟的听觉系统的人，例如新生儿、幼儿、儿童、青少年或成人。