[发明专利]免疫缺陷小鼠

说明书

本发明的目的为提供使人造血干细胞的长期植入成为可能的人源化小鼠。本发明是向G‑CSF受体基因座中敲入人G‑CSF基因、使G‑CSF受体的功能缺损而得的免疫缺陷啮齿类动物，并且是向表达人G‑CSF且不表达啮齿类的G‑CSF受体的人G‑CSF基因敲入啮齿类动物移植人造血干细胞而得的、在外周循环有人嗜中性粒细胞的人源化啮齿类动物。

技术领域

本发明涉及能够重现人的自然免疫系统的啮齿类动物。

背景技术

作为非常优异的免疫缺陷小鼠，NOG小鼠是已知的(专利文献1)。向NOG小鼠中移植人的细胞、组织，可制备人源化NOG小鼠。为了重现人自然免疫系统，需要人嗜中性粒细胞等人粒细胞长期在外周进行循环的小鼠。出于该目的，存在移植有人造血干细胞、并施予人G-CSF蛋白的小鼠(非专利文献1、2)，但人嗜中性粒细胞植入是暂时性的，并且小鼠的嗜中性粒细胞也增加，因此，不能特化为人的自然免疫系统成为主要问题。

此外，嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞均为与变态反应疾病相关的自然免疫系统细胞。存在人嗜酸性粒细胞、人嗜碱性粒细胞分化的小鼠(非专利文献3、4)。然而，任一种小鼠中均仅有少量的人嗜酸性粒细胞和人嗜碱性粒细胞分化，尚不存在可长期维持充足的量的啮齿类。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开第WO2002/043477号

非专利文献

非专利文献1：Tanaka S.等，J Immunol.2012 Jun 15；188(12):6145-55

非专利文献2：Coughlan AM等，Stem Cells Dev.2016 Apr 1；25(7):530-41

非专利文献3：Ito R等，Journal of immunology 2013；191:2890-2899.

非专利文献4：Ito R等，JCI Insight.2018Nov 2；3(21)

发明内容

发明所要解决的课题

本发明的目的为提供小鼠的自然免疫系统未激活、且能够长期重现人的自然免疫系统的人源化小鼠。

用于解决课题的手段

本申请的发明人为了使人嗜中性粒细胞的植入性亢进，将作为嗜中性粒细胞的诱导因子而已知的人G-CSF细胞因子敲入免疫缺陷小鼠中。此时，为了阻止人G-CSF与小鼠的G-CSF受体交叉反应而激活小鼠的自然免疫系统，将人G-CSF基因敲入小鼠的G-CSF受体基因座中，使小鼠G-CSF受体的功能缺损。

结果，制出了血清中存在人G-CSF、并于免疫缺陷小鼠中重建有人造血系统的人源化小鼠，从而完成了本发明。

进而，制出了在前述的血清中存在人G-CSF、并于免疫缺陷小鼠中重建有人造血系统的人源化小鼠中使与抗体Fc区进行结合的受体缺损、人嗜中性粒细胞的分化比前述小鼠亢进的人源化小鼠，完成了另一项本发明。

并且，制出了在人嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞以少量程度分化的hIL-3/hGM-CSFTg小鼠和hIL-3/hGM-CSF/hIL-5Tg小鼠中使与抗体Fc区进行结合的受体缺损、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞的分化亢进的人源化小鼠，完成了又一项本发明。

即，本发明如下所述。

[1]人G-CSF基因敲入啮齿类动物，其是向G-CSF受体基因座中敲入人G-CSF基因、使G-CSF受体的功能缺损而得的免疫缺陷啮齿类动物，所述动物表达人G-CSF且不表达啮齿类的G-CSF受体。

[2][1]的人G-CSF基因敲入啮齿类动物，其为小鼠。