[发明专利]用等离子体连续处理

说明书

本发明涉及一种用于生产其上附着有分子或大分子的产品的连续方法以及一种用于执行该方法的装置。该方法包括以下步骤：(a)将物体放置在表面上或表面附近；(b)控制所述表面相对于其周围环境的电势；(c)通过将所述物体暴露于放电来激活所述物体；(d)使所述物体与待附着的分子或大分子接触。此类大分子包括噬菌体。因此，本发明方法的产品用于预防和改善本发明方法的产品或与所述产品接触的材料的细菌污染。

技术领域

本发明涉及用于生产其上附着有分子或大分子的产品的方法和装置。此类大分子包括噬菌体。因此，本发明方法的产品用于预防和改善本发明方法的产品或与所述产品接触的材料的细菌污染。

背景技术

噬菌体(“噬菌体”)是在细菌内感染和复制的病毒。“裂解性”噬菌体会导致细菌细胞在病毒粒子在细菌内复制后破裂(裂解)并被破坏。当细胞被破坏时，噬菌体后代可以找到新的宿主进行感染。噬菌体是地球上最多的生命形式。可以在细菌生长的所有环境中发现噬菌体。例如，在地下水和地表水、土壤、食物(例如酸菜、葡萄酒)、污水和污泥中检测到噬菌体。也已经从人和动物中分离出噬菌体，例如从粪便、尿液、唾液、唾液、瘤胃和血清中分离。已知将游离噬菌体施用于产品，例如通过喷雾。然而，尚未发现此类处理在预防或治疗细菌污染方面是可靠有效的。

噬菌体能够穿透不同的器官和组织，包括中枢神经系统，并且与其细菌宿主一起是肠道菌群的一部分。噬菌体是水生生态系统中10-80％的总细菌死亡率的原因，并且是限制细菌群体的重要因素。

噬菌体能够分散在固体和液体介质中。国际专利申请WO03/093462公开了可以使用化学方法或放电将固定化的噬菌体共价附着到基底上，使得它们不可能自由扩散，但保留它们感染细胞的能力，从而随后引起细菌裂解和游离噬菌体的释放。

在WO2007/072049中，这些方法被开发为使用脉冲场电晕放电；将放电激活的颗粒滴入噬菌体溶液中。类似地，在WO2012/175749中，将噬菌体溶液与活化的种子组合。

噬菌体的治疗应用是已知的。WO03/093462公开了用于固定病毒，特别是噬菌体，同时保留其生物活性以用作抗菌剂的方法。鉴于噬菌体的天然环境是水性的，已经广泛假设如WO03/093462中公开的对脱水的稳定性倾向于在水性介质中的天然稳定性。

WO2012/175749描述了其上附着有噬菌体的小颗粒，其适合于与食品组合以改善其细菌污染，如本文所公开的。

WO2014/049008描述了其上附着有噬菌体的小颗粒，其特别适合于治疗或预防细菌感染。

Wang等人(2015)[说明书末尾的参考文献[1]]已经表明，在氧气气氛中低压等离子体处理(一种放电处理形式)1分钟增强了噬菌体对表面的粘附。

使分子或大分子(包括噬菌体)稳定结合的这种表面处理被称为“活化”。通过电晕放电或其它等离子体产生电方法进行表面活化是众所周知的(参见例如Barton等人[2]、Canavan等人[3]、Recek等人[4]、Kerkeni等人[5]等)。在工业实践中，例如在印刷中，众所周知的是，这种电处理导致表面的亲水性(润湿性)增加，并因此改善粘附性。这种由于更大的氢键而增加的粘附性不同于上述专利中描述的使用电活化表面和噬菌体之间的快速接触来实现共价键合。

此外，US7,250,195公开了产生电晕放电，该电晕放电被引入真空室中以将生物材料(包括氨基酸和蛋白质，但不包括噬菌体)沉积到基底上。

WO2014/134297公开了通过在噬菌体可以共价键合的基底的表面上形成羧酸残基来将噬菌体共价附着到表面上的方法。

在本领域中，只有批量制造方法是实用的。例如，将材料置于浅活化容器中并从上方进行电晕活化，然后快速与含有待固定的噬菌体的溶液接触。该方法或多或少适用于在一个表面上发生固定的片材(平面)材料，尽管它也不能有效地用于丝状和颗粒材料。