[发明专利]结直肠癌筛选检查及早期检测方法

权利要求书

1.一种用于对象中的癌症疾病的诊断、预后、分层和/或治疗监测的方法，其包含以下步骤：

（a）提供来自所述对象的生物样本，

（b）确定所述生物样本中至少一种（2、3、4、5、6 或7或更多种）蛋白质生物标志物的水平（浓度），所述蛋白质生物标志物选自蛋白质生物标志物双调蛋白（AREG）、癌胚抗原（CEA）、胰岛素样生长因子结合蛋白2（IGFBP2）、角蛋白I型细胞骨架19（KRT19）、甘露聚糖结合凝集素丝氨酸蛋白酶1（MASP1）、骨桥蛋白（OPN）、血清对氧磷酶内酯酶3（PON3）和转铁蛋白受体蛋白1（TR），

其中与健康对照或参考值相比，在步骤（b）中所确定的来自所述对象的生物样本中的至少一种、优选二、三、四和最优选5种生物标志物的差异水平，表明所述对象中癌症疾病的存在。

2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤（b）包含确定所述生物标志物中的至少4种的组合，优选（i）MASP1、OPN、PON3和TR，或（ii）AREG、MASP1、OPN、PON3和TR，或（iii）AREG、MASP1、OPN、PON3、TR、CEA和KRT19。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中步骤（b）包含确定所述生物样本中至少蛋白质生物标志物TR、OPN、IGFBP2、MASP1和PON3的水平。

4.根据权利要求3所述的方法，其中步骤（b）包含确定所述生物样本中选自AREG、CEA和/或KRT19的一种或多种额外的生物标志物的水平。

5.根据权利要求4所述的方法，其中步骤（b）包含确定所述生物样本中至少蛋白质生物标志物TR、OPN、IGFBP2、MASP1、PON3、AREG、CEA和KRT19的水平。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述生物样本是组织样本或体液样本，优选血液样本，最优选血浆样本。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述方法是非侵入性方法，优选间接体内方法或体外方法。

8.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述方法是用于建立所述对象中的癌症的首次诊断的筛选方法。

9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述癌症是结直肠癌、胃癌或胰腺癌，并且优选是早期或晚期CRC。

10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述生物标志物的水平是使用对相应生物标志物蛋白质中的一种或多种具有特异性的一种或多种抗体来确定的，优选其中所述蛋白质生物标志物通过蛋白质印迹、ELISA、邻位延伸分析或质谱来检测，最优选通过液相色谱-多反应监测/质谱（LC-MRM/MS）和/或邻位延伸分析（PEA）来检测。

11.一种诊断试剂盒，其用于执行前述权利要求中任一项所述的方法。

12.根据权利要求11所述的诊断试剂盒，其包含用于检测所述至少一种生物标志物的一种或多种抗体或其抗原结合片段。

13.抗体或其抗原结合片段在执行权利要求1至10中任一项所述的方法中的应用，所述抗体或其抗原结合片段针对选自TR、OPN、IGFBP2、MASP1、PON3、AREG、CEA和/或KRT19的蛋白质生物标志物中的任意一种。

14.一种筛选检查方法，其用于在之前没有被诊断出患有癌症疾病的对象中的所述癌症疾病的早期检测，所述癌症疾病优选为CRC，该方法包含

（a）提供待筛选的对象的生物样本，

（b）用如此提供的所述对象的生物样本执行权利要求1至12中任一项所述的方法。

15.根据权利要求14所述的方法，其中如果所确定的生物标志物的水平表明癌症疾病的存在，则（i）用所述对象的提供的独立的生物样本重复该方法，和/或（ii）安排所述对象进行所述癌症疾病的二次诊断。