[发明专利]前体三特异性抗体构建体及其使用方法

权利要求书

1.一种前体三特异性抗体构建体，其包含：

(a)结合第一肿瘤相关抗原(TAA)的第一结合结构域；

(b)结合第二TAA的第二结合结构域；

(c)结合人CD3ε的细胞外表位的第三结合结构域；和

(d)调节结构域，所述调节结构域包含

(i)第一子调节结构域和第二子调节结构域，所述第一子调节结构域包含第一蛋白酶切割结构域和半衰期延长(HLP)结构域，并且所述第二子调节结构域包含第二蛋白酶切割结构域和降低所述第三结合结构域结合人CD3ε的细胞外表位的能力的CAP组件；或

(ii)单个调节结构域，其包含蛋白酶切割结构域、半衰期延长(HLP)结构域和降低所述第三结合结构域结合人CD3ε细胞外表位的能力的CAP组件。

2.根据权利要求1所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述第一结合结构域和所述第二结合结构域结合相同的TAA或结合不同的TAA。

3.根据权利要求1所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述第一TAA、或所述第二TAA、或所述第一TAA和所述第二TAA两者选自肿瘤细胞表面抗原的细胞外表位、肿瘤微环境抗原、肿瘤微环境(TME)中的基质抗原、TME中的血管生成抗原、TME中血管上的抗原、TME中的细胞因子抗原、以及它们的任何组合。

4.根据权利要求3所述的前体三特异性抗体构建体，其中由所述第一结合结构域或所述第二结合结构域或两者结合的所述TAA选自EGFR、ROR1、PSMA和5T4。

5.根据权利要求4所述的前体三特异性抗体构建体，其中

(a)当所述TAA是EGFR时，所述第一结合结构域或所述第二结合结构域或两者包含SEQID NO:34、37的任一或其组合中叙述的氨基酸序列；

(b)当所述TAA是ROR1时，所述第一结合结构域或所述第二结合结构域或两者包含SEQID NO：156和166的任一或其组合中叙述的氨基酸序列；

(c)当所述TAA是PSMA时，所述第一结合结构域或所述第二结合结构域或两者包含SEQID NO：168和170的任一或其组合中叙述的氨基酸序列；和

(d)当所述TAA是5T4时，所述第一结合结构域或所述第二结合结构域或两者包含SEQID NO：172和174的任一或其组合中叙述的氨基酸序列。

6.根据权利要求3所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述肿瘤微环境抗原选自KIR、LILR和TIGIT。

7.根据权利要求3所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述肿瘤微环境中的基质抗原选自成纤维细胞活化蛋白(FAP)、α平滑肌肌动蛋白(αSMA)、PDGFRα、整合素α11β1(ITGA11)VEGF、腱生蛋白-C、骨膜蛋白、成纤维细胞特异性蛋白1(S10A4、FSP1)、结蛋白、波形蛋白、帕拉丁、尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂受体相关蛋白(UPARAP)、半乳糖凝集素-3、平足蛋白、血小板、CCL2和CXCL12。

8.根据权利要求3所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述肿瘤微环境中的所述血管生成抗原选自bFGF、INF和VEGF。

9.根据权利要求3所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述肿瘤微环境中血管表面上的所述抗原选自CD31、CD105、CD146和CD144。

10.根据权利要求3所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述细胞因子抗原选自TNF-α、IL-6、TGF-β、IL-10、IL-8、IL-17、IL-21、INF和VEG。

11.根据权利要求1所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述HLP结构域包含人血清白蛋白(HSA)多肽。

12.根据权利要求1所述的前体三特异性抗体构建体，其中所述CAP组件包含人CD3ε的细胞外表位的氨基酸序列。