[发明专利]非病毒DNA载体及其用于表达FVIII治疗剂的用途

权利要求书

1.一种无衣壳闭合端DNA(ceDNA)载体，其包含：

在侧翼反向末端重复序列(ITR)之间的至少一种异源核苷酸序列，其中至少一种异源核苷酸序列编码至少一种FVIII蛋白，其中编码至少一种FVIII蛋白的至少一种异源核苷酸序列选自与表1中的任何序列具有至少有85％同一性的以下序列。

2.根据权利要求1所述的ceDNA载体，其中所述ceDNA载体包含选自与表9中序列具有至少85％同一性的序列的核酸序列。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的ceDNA载体，其中所述ceDNA载体包含与SEQ IDNO:210至少85％相同的核酸序列。

4.根据权利要求1或权利要求2所述的ceDNA载体，其中所述ceDNA载体包含与SEQ IDNO:214至少85％相同的核酸序列。

5.根据权利要求1到4中任一项所述的ceDNA载体，其中所述ceDNA载体包含与编码至少一种FVIII蛋白的至少一个异源核苷酸序列可操作地连接的启动子。

6.根据权利要求1到5中任一项所述的ceDNA载体，其中所述ceDNA载体包含增强子。

7.根据权利要求1到6中任一项所述的ceDNA载体，其中所述ceDNA载体包含5'UTR和/或内含子序列。

8.根据权利要求1到7中任一项所述的ceDNA载体，其中所述ceDNA载体包含3'UTR序列。

9.根据权利要求1到8中任一项所述的ceDNA载体，其中所述ceDNA载体包含至少一个poly A序列。

10.如权利要求1到9中任一项所述的ceDNA载体，其中所述ceDNA载体包含至少一个可操作地连接到至少一种异源核苷酸序列的启动子。

11.根据权利要求1到10中任一项所述的ceDNA载体，其中至少一种异源核苷酸序列是cDNA。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的ceDNA载体，其中至少一个ITR包含功能末端解链位点和Rep结合位点。

13.根据权利要求1到12中任一项所述的ceDNA载体，其中所述ITR中的一个或两个来自病毒，所述病毒选自细小病毒、依赖病毒和腺相关病毒(AAV)。

14.根据权利要求1到13中任一项所述的ceDNA载体，其中所述侧接ITR是对称或不对称的。

15.根据权利要求14所述的ceDNA载体，其中所述侧接ITR是对称或基本对称的。

16.根据权利要求14所述的ceDNA载体，其中所述侧接ITR是不对称的。

17.根据权利要求1到16中任一项所述的ceDNA载体，其中所述ITR中的一个或两个是野生型，或其中所述ITR中的两个都是野生型。

18.根据权利要求1到17中任一项所述的ceDNA载体，其中所述侧接ITR来自不同病毒血清型。

19.根据权利要求1到18中任一项所述的ceDNA载体，其中所述侧接ITR来自表2中所示的病毒血清型对。

20.根据权利要求1到19中任一项所述的ceDNA载体，其中所述ITR中的一个或两个包含选自表3、表5A、表5B或表6中的序列的序列。