[发明专利]混合细胞基因疗法

说明书

本发明涉及一种用以通过提供用寻求表达的基因转染或转导的第一哺乳动物细胞群体和尚未用所述基因转染或转导的第二哺乳动物细胞群体来在靶标部位处产生治疗性蛋白质的混合细胞组合物，其中在所述靶标部位处所述第二哺乳动物细胞群体的内源性存在形式降低，并且其中由所述第一哺乳动物细胞群体在所述靶标部位处对所述治疗性蛋白质的产生刺激第二群体细胞以诱导治疗作用。

背景技术

技术领域：

本发明涉及使用细胞混合物来进行体细胞基因疗法。本发明还涉及一种包括用编码转化生长因子β超家族的成员的基因转染或转导的哺乳动物细胞和尚未用编码转化生长因子β超家族的成员的基因转染或转导的结缔组织细胞的细胞混合物。本发明还涉及一种通过将细胞混合物注射至哺乳动物结缔组织来使软骨再生的方法。此外，本发明涉及一种通过将细胞混合物注射至哺乳动物结缔组织来治疗骨关节炎的方法。

相关技术的简述：

在矫形外科领域中，退行性关节炎或骨关节炎是与软骨损害相关的最多发疾病。身体中的几乎每个关节诸如膝部、臀部、肩部乃至腕部都受影响。这个疾病的发病机理是透明关节软骨的退行(Mankin等人,J Bone Joint Surg,52A:460-466,1982)。关节的透明软骨变得变形，原纤化，并且最终凹陷。如果可以某种方式使变性的软骨再生，那么大多数患者将能够在无致衰弱性疼痛的情况下享受他们的生活。

用以将药物携带至关节的传统药物递送途径诸如口服、静脉内或肌肉内施用是低效的。关节内注射的药物的半衰期通常是短暂的。关节内注射药物的另一缺点是必须频繁重复注射以在关节间隙处获得可接受的药物水平以治疗慢性疾患诸如关节炎。因为迄今为止治疗剂不可选择性靶向关节，所以必须使哺乳动物宿主暴露于全身性高浓度的药物以实现持续关节内治疗剂量。以这个方式的非靶标器官暴露加剧了抗关节炎药物产生严重副作用的倾向，所述严重副作用诸如是哺乳动物宿主的胃肠紊乱以及血液系统、心血管系统、肝和肾系统的变化。

在矫形外科领域中，一些细胞因子已被视为用于治疗矫形外科疾病的候选物。骨形态发生蛋白已被视为一种有效的骨形成刺激物(Ozkaynak等人,EMBO J,9:2085-2093,1990；Sampath和Rueger,Complications in Ortho,101-107,1994)，并且TGF-β已被报道为一种骨发生和软骨形成刺激物(Joyce等人,J Cell Biology,110:2195-2207,1990)。

转化生长因子-β(TGF-β)被视为一种多功能性细胞因子(Sporn和Roberts,Nature(London),332:217-219,1988)，并且在细胞生长、分化和细胞外基质蛋白合成方面起调控作用(Madri等人,J Cell Biology,106:1375-1384,1988)。TGF-β在体外抑制上皮细胞和破骨细胞样细胞的生长(Chenu等人,Proc Natl Acad Sci,85:5683-5687,1988)，但它在体内刺激软骨内骨化，并且最终刺激骨形成(Critchlow等人,Bone,521-527,1995；Lind等人,AOrthop Scand,64(5):553-556,1993；以及Matsumoto等人,In vivo,8:215-220,1994)。TGF-β诱导的骨形成由它对骨膜下多潜能细胞的刺激介导，所述骨膜下多潜能细胞最终分化成软骨形成细胞(Joyce等人,J Cell Biology,110:2195-2207,1990；以及Miettinen等人,J Cell Biology,127-6:2021-2036,1994)。