[发明专利]用于改善腺相关病毒(AAV)组装的方法和组合物

权利要求书

1.用于改善细胞中腺相关病毒(AAV)的组装的方法，所述方法包括：

增加所述细胞中Hsc/Hsp70或其辅因子、液泡特异性H+ATP酶和/或细胞周期蛋白依赖性激酶2的表达或活性以产生经修饰的细胞；

用AAV载体感染所述经修饰的细胞以产生感染的经修饰的细胞；

培养所述感染的经修饰的细胞；和

收集组装的AAV。

2.权利要求1所述的方法，其中收集的所述组装的AAV的量大于AAV感染缺乏所述修饰的细胞后收集的组装的AAV的量。

3.权利要求1或2所述的方法，其中所述方法导致所述AAV的滴度的显著增加。

4.用于改善腺相关病毒(AAV)的组装的方法，所述方法包括：

从具有所述AAV的经修饰的细胞产生AAV，其中所述细胞已经经过修饰以展现出一种或多种基因或由其编码的蛋白质的增加或减少，所述蛋白质选自CHMP7、CEP72、CNOT6、SLC9A6、PPHLN1、ATF7IP、SETDB1、GPR89B、KIF16B、ATAD3A、BAG2、STUB1、DNAJA1、DNAJC7、HSPA8、HSPA1A、CDK1、CDK2、CHCHD2、C1QBP、DPYSL5、FXR1、FXR2、IPO5、LBR、MTPN、NPM3、NPM1、PPL、SNX3、UBE2O、SAE1、CCDC124、GNB1、RAB1A、GNB4、RPL23、CKB、SRP9、UCHL1和TBCB；和

收集组装的AAV。

5.权利要求4所述的方法，其中所述经修饰的细胞是基因工程细胞。

6.权利要求5所述的方法，其中所述基因工程细胞包括敲除、敲低、过表达或其组合。

7.权利要求4所述的方法，其中所述经修饰的细胞包含增加或减少所述一种或多种基因或由其编码的蛋白质的化学化合物。

8.权利要求7所述的方法，其中所述化学化合物选自由Cdk1抑制剂IV、Cdk2抑制剂II、apoptazole、ML-792、BML282、NSC348884、FDNB和巴弗洛霉素A1组成的组。

9.用于组装腺相关病毒的无细胞培养系统，其包含：

培养基；和

至少两种蛋白质，或编码所述至少两种蛋白质的核酸，所述蛋白质选自CHMP7、CEP72、CNOT6、SLC9A6、PPHLN1、ATF7IP、SETDB1、GPR89B、KIF16B、ATAD3A、BAG2、STUB1、DNAJA1、DNAJC7、HSPA8、HSPA1A、CDK1、CDK2、CHCHD2、C1QBP、DPYSL5、FXR1、FXR2、IPO5、LBR、MTPN、NPM3、NPM1、PPL、SNX3、UBE2O、SAE1、CCDC124、GNB1、RAB1A、GNB4、RPL23、CKB、SRP9、UCHL1和TBCB。

10.权利要求9所述的无细胞培养系统，其包含至少三种(例如，至少四种、至少五种等)蛋白质或编码所述至少三种蛋白质的核酸。

11.细胞系，其包含：

Hsc/Hsp70或其辅因子、液泡特异性H+ATP酶和/或细胞周期蛋白依赖性激酶2中的一个或多个突变；和/或

表达Hsc/Hsp70或其辅因子、液泡特异性H+ATP酶和/或细胞周期蛋白依赖性激酶2的一种或多种外源性构建体。

12.权利要求11所述的细胞系，其中所述突变包括敲除突变。

13.权利要求11所述的细胞系，其中所述突变包括敲低突变。

14.权利要求11所述的细胞系，其中所述一种或多种外源性构建体是重组构建体。