[发明专利]修饰的IL-2蛋白、PEG偶联物及其用途

权利要求书

1.一种修饰的白细胞介素-2(IL-2)蛋白，包含一个工程谷氨酰胺(Q)残基。

2.根据权利要求1所述的修饰IL-2蛋白，其中所述工程化的Q残基位于IL-2受体α(IL-2Rα)亚基结合域内。

3.根据权利要求1所述的修饰IL-2蛋白，其中所述工程化的Q残基在IL-2Rα亚基结合结构域外约1至约3个氨基酸残基之间。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的修饰IL-2蛋白，其中所述修饰IL-2蛋白包含一个工程化的Q残基。

5.根据权利要求1-3中任一项所述的修饰IL-2蛋白，其中所述修饰IL-2蛋白包含两个或更多个工程化的Q残基。

6.根据权利要求1-5中任一项的修饰IL-2蛋白，其中所述工程化的Q残基是相对于亲本IL-2蛋白的单个氨基酸突变或是所述单个氨基酸突变的结果。

7.根据权利要求6的修饰IL-2蛋白，其中所述亲本IL-2蛋白包含SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。

8.根据权利要求7的修饰IL-2蛋白，其中所述单个氨基酸突变选自下组：F43Q、R37Q、F41Q、K42Q、Y44Q、T36Q、M38Q或其组合。

9.根据权利要求8所述的修饰的IL-2蛋白，其中所述修饰的IL-2蛋白包含SEQ ID NO：2和4-8中任一所示的氨基酸序列。

10.根据权利要求1-5中任一项的修饰IL-2蛋白，其中所述工程化的Q残基是适合谷氨酰胺转胺酶(TGase)反应的外源补丁序列的一部分。

11.根据权利要求10所述的修饰IL-2蛋白，其中所述外源补丁序列取代亲本IL-2蛋白的一部分。

12.根据权利要求11所述的修饰IL-2蛋白，其中所述亲本IL-2蛋白包含SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。

13.根据权利要求10-12中任一项所述的修饰IL-2蛋白，其中所述外源补丁序列选自下组：LEEQAA(SEQ ID NO：9)，IFKQTY(SEQ ID NO：10)、PKEQKY(SEQ ID NO：11)、VIQGV(SEQ IDNO：12)、REEQFN(SEQ ID NO：13)、GLLQGA(SEQ ID NO：14)或其组合。

14.根据权利要求13所述的修饰IL-2蛋白，其中所述修饰IL-2蛋白包含SEQ ID NO：3和15-19中任一所示的氨基酸序列。

15.根据权利要求1-14中任一项的修饰IL-2蛋白，其中修饰的IL-2蛋白与IL-2Rα亚基的结合K_D为亲本IL-2蛋白与IL-2Rα亚基之间的结合K_D的约2～800倍。

16.根据权利要求1-15中任一项的修饰IL-2蛋白，其中修饰后的IL-2蛋白与IL-2Rβ亚基的结合K_D为亲本IL-2蛋白与IL-2Rβ亚基之间的结合K_D的约1-30倍。

17.根据权利要求1-16中任一项所述的修饰的IL-2蛋白，其中所述修饰的IL-2蛋白能够激活选自下组的免疫细胞：杀伤T细胞(T_c，细胞毒性T淋巴细胞，或CTL)、辅助性T细胞(T_h)、调节性T细胞(Treg)、γδT细胞、自然杀伤T(NKT)细胞和自然杀伤(NK)细胞。