[发明专利]用于CAR-T细胞治疗的脂质-荧光素缀合物的设计和有效合成

说明书

本公开内容涉及脂质‑荧光素缀合物、包含所述脂质‑荧光素缀合物的组合物、以及合成方法和用途，例如在癌症治疗中的用途。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2019年7月5日提交的美国临时专利申请No.62/870,926的优先权的权益，其全部内容通过引用在此并入。

技术领域

本公开内容涉及脂质-荧光素缀合物、包含所述脂质-荧光素缀合物的组合物、以及合成方法和用途，例如在癌症治疗，例如CAR-T细胞治疗中的用途。

背景技术

胶质瘤是儿童中最常见的癌症之一。由于其异质性，胶质瘤不呈现单一突出的抗原。因此，针对小儿胶质瘤的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor，CAR)T细胞治疗将需要鉴定和靶向泛癌抗原(pan-cancer antigen)。最近，报道了一种通用的抗FITC(异硫氰酸荧光素)CAR-T细胞，其中施用具有与肿瘤特异性配体连接的荧光素的双特异性衔接子分子促进CAR-T细胞与肿瘤细胞的桥接，并且随后CAR-T细胞活化杀伤癌细胞。已经报道了特异性地靶向癌细胞膜的某些合成磷脂醚(phospholipid ether，PLE)。因为它们靶向癌细胞膜本身，所以它们有成为泛癌靶向配体的潜能。已知这些PLE会被正常细胞快速分解代谢，但会在肿瘤细胞膜上持续很长时间。此外，这些PLE需要冗长的合成(12至17个步骤)。

含有与异硫氰酸荧光素缀合的PLE(称为FL-PLE)的双特异性衔接子分子与抗FITCCAR-T细胞组合使用，以实现针对胶质瘤的治疗(图1)。聚乙二醇(PEG3)接头用于连接FITC和脂质组分。FL-PLE是在12个步骤的合成中产生的。为了提高对癌症的特异性，以在荧光素的芳环上的-OH上存在保护基(其被存在于癌症中的活性氧物质选择性地裂解)的形式(称为Pro-FL-PLE)引入额外水平的特异性(图2)。基于Pro-FL-PLE的显像剂在胶质瘤中显示出约1.5的肿瘤与背景比，这表明这种受保护的形式在CAR-T细胞治疗剂靶向癌组织时可显示出对癌组织的特异性。Pro-FL-PLE的合成以17个步骤完成。

仍然需要开发具有更有效合成的对癌细胞膜具有特异性的PLE。本公开内容的一个目的是提供这样的治疗剂。从本文中提供的描述中，这些以及其他的目的和优点将是明显的。

发明概述

提供了式(I)或(II)化合物或其可药用盐：

其中：

R¹独立地为H或在肿瘤胞外基质中脱保护的保护基；

Y为不存在、-N(H)C(S)N(H)-、-N(H)C(O)N(H)-、-N(H)C(O)-、-N(H)C(S)-、-C(O)-N(H)-、-C(S)N(H)-、-C(O)O-、-N(H)-、-S(O)N(H)-、-S(O)₂N(H)-、-S(O)₃-、-P(O)₂N(H)-或-P(O)₃-；

L是接头；并且

脂质是癌细胞靶向脂质；并且

至少一个R¹是保护基。

还提供了包含式(I)或(II)化合物和可药用载体的药物组合物。

又提供了治疗癌症的方法，其包括向患有癌症的对象施用式(I)或(II)化合物。

本公开内容还涉及制备脂质-FITC的方法，其包括：

使脂质与异硫氰酸荧光素和碱在溶剂中反应。

本公开内容还涉及制备掩蔽的(masked)脂质-FITC的方法，其包括：