[发明专利]UBE3A基因和表达盒及其应用

权利要求书

1.一种多核苷酸，其包含人UBE3A开放阅读框，其中所述人UBE3A开放阅读框编码人UBE3A短亚型和长亚型。

2.根据权利要求1所述的多核苷酸，其中所述人UBE3A开放阅读框编码人UBE3A短亚型(即，亚型1)和长亚型2。

3.根据权利要求1所述的多核苷酸，其中所述人UBE3A开放阅读框编码人UBE3A短亚型(即，亚型1)和长亚型3。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的多核苷酸，其中与缺少一个或更多个降低表达的核苷酸修饰的天然ORF的表达相比，所述人UBE3A开放阅读框包含一个或更多个降低所述长亚型的表达的核苷酸修饰。

5.根据权利要求4所述的多核苷酸，其包含的所述长亚型的表达与不包含降低表达的核苷酸修饰的天然ORF相比降低至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或95％。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的多核苷酸，其中与不包含增强表达的核苷酸修饰的天然ORF相比，所述人UBE3A开放阅读框包含一个或更多个增强所述短亚型的表达的核苷酸修饰(例如，使表达增强10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％或更多)。

7.根据权利要求6所述的多核苷酸，其中与不包含增强表达的核苷酸修饰的天然ORF相比，所述短亚型的表达增强至少10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或95％。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的多核苷酸，其中所述人UBE3A开放阅读框包含一个或更多个核苷酸修饰来编码所述短亚型，使其与所述长亚型的表达相比以约1:1至约15:1的比例表达。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的多核苷酸，其包含可操作地连接至所述长亚型的编码序列的第一Kozak序列，所述第一Kozak序列包含SEQ ID NO:6。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的多核苷酸，其包含可操作地连接至所述短亚型的编码序列的第二Kozak序列，所述第二Kozak序列包含SEQ ID NO:8。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的多核苷酸，其中所述人UBE3A开放阅读框针对在人细胞中表达被密码子优化。

12.根据权利要求12所述的多核苷酸，其中所述人UBE3A开放阅读框针对在人细胞中的细胞内表达或非分泌性表达被密码子优化。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的多核苷酸，其中所述人UBE3A开放阅读框包含核苷酸序列SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:26或SEQ ID NO:27，或与其具有至少约70％、75％、76％、77％、80％、85％或90％同一性的核苷酸序列。

14.一种表达盒，其包含权利要求1-13中任一项所述的多核苷酸。

15.根据权利要求14所述的表达盒，其中所述人UBE3A开放阅读框可操作地连接至启动子。

16.根据权利要求15所述的表达盒，其中所述启动子是神经元特异性启动子。

17.根据权利要求15或16所述的表达盒，其中所述启动子是人突触素启动子。

18.根据权利要求14-17中任一项所述的表达盒，其中所述人UBE3A开放阅读框可操作地连接至多聚腺苷酸化信号。