[发明专利]微生物产生植物大麻素和植物大麻素前体的方法和细胞

权利要求书

1.一种在产生聚酮化合物和异戊烯基供体的宿主细胞中产生植物大麻素或植物大麻素类似物的方法，所述方法包括：

用编码异戊烯转移酶PT104蛋白的序列转化所述宿主细胞，并且培养转化的宿主细胞以产生所述植物大麻素或植物大麻素类似物。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述PT104蛋白包括下述或由下述组成：

(a)如SEQ ID NO:1中阐示的蛋白；

(b)与SEQ ID NO:1具有至少70％的同一性的蛋白；

(c)与(a)的不同在于替换、缺失和/或插入一个或多个残基的蛋白；或

(d)(a)、(b)或(c)的衍生物。

3.根据权利要求1所述的方法，其中编码异戊烯转移酶PT104蛋白的序列包括下述或由下述组成：

(a)如SEQ ID NO:17的98至1153位中阐示的核苷酸序列；

(b)与(a)的核苷酸序列具有至少70％的同一性的核苷酸序列；

(c)与(a)的核酸的互补链杂交的核苷酸序列；

(d)与(a)的不同在于替换、缺失和/或插入一个或多个核苷酸的核苷酸序列；或

(e)(a)、(b)、(c)或(d)的衍生物。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述聚酮化合物为：

5.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述异戊烯基供体为：

6.根据权利要求5所述的方法，其中所述异戊烯基供体为香叶基焦磷酸(GPP)、法尼基焦磷酸(FPP)或橙花基焦磷酸(NPP)。

7.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述植物大麻素或植物大麻素类似物为：

8.根据权利要求2所述的方法，其中在步骤(b)中，所述蛋白与SEQ ID NO:1具有至少85％的序列同一性。

9.根据权利要求3所述的方法，其中在步骤(b)中，所述核苷酸序列具有至少85％的序列同一性。

10.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述聚酮化合物为橄榄醇、橄榄酸、二瓦林酚、二瓦林酚酸、地衣酚或苔色酸。

11.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述植物大麻素为大麻萜酚(CBG)、大麻萜酚酸(CBGa)、次大麻萜酚(CBGv)、次大麻萜酚酸(CBGva)、大麻萜烯(CBGO)或大麻萜烯酸(CBGOa)。

12.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中：

当所述聚酮化合物为橄榄醇时，则所述植物大麻素为大麻萜酚(CBG)，

当所述聚酮化合物为橄榄酸时，则所述植物大麻素为大麻萜酚酸(CBGa)，

当所述聚酮化合物为二瓦林酚时，则所述植物大麻素是次大麻萜酚(CBGv)，

当所述聚酮化合物为二瓦林酚酸时，则所述植物大麻素是次大麻萜酚酸(CBGva)，

当所述聚酮化合物为地衣酚时，则所述植物大麻素为大麻萜烯(CBGO)，或

当所述聚酮化合物为苔色酸时，则所述植物大麻素为大麻萜烯酸(CBGOa)。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述宿主细胞为细菌细胞、真菌细胞、原生生物细胞或植物细胞。