[发明专利]用于鉴定集落形成细胞的测定

权利要求书

1.用于检测分化的造血细胞的方法，其包括下述步骤：

a) 在支持物上以1-1000个细胞的组分离未分化的造血干细胞，

b) 通过提供包含生长因子的细胞培养基使分离的细胞增殖以形成分化的造血细胞的细胞集落，

c) 使所述细胞集落与一种或多种标记缀合物接触，所述标记缀合物包含至少一个检测部分和至少一个针对CD14、CD235a和CD15的抗原识别部分，

d) 检测用所述标记缀合物标记的细胞集落中分化的造血干细胞的相对量。

2.根据权利要求1的方法，其特征在于通过用所述标记缀合物标记的细胞的相对量将细胞集落中的分化的造血干细胞检测为CFU-GEMM、CFU-GM、CFU-M、BFU-E和CFU-G。

3.根据权利要求1或2的方法，其特征在于所述方法在不存在甲基纤维素的情况下进行。

4.根据权利要求1-3中任一项的方法，其特征在于将包含未分化的造血干细胞的细胞样品提供给步骤a)，在所述细胞样品中红细胞被裂解。

5.根据权利要求1-4中任一项的方法，其特征在于将包含未分化的造血干细胞的细胞样品提供给步骤a)，在所述细胞样品中CD34+细胞被富集。

6.根据权利要求5的方法，其特征在于所述细胞样品的所述CD34+细胞被富集到至少50％的纯度。

7.根据权利要求1-6中任一项的方法，其特征在于，所述检测部分选自发色团部分、荧光部分、磷光部分、发光部分、吸光部分、放射性部分、过渡金属和同位素质量标签部分。

8.根据权利要求1-7中任一项的方法，其中所述抗原识别部分是抗体、片段化抗体、片段化抗体衍生物、靶向TCR分子的肽/MHC复合物、细胞粘附受体分子、共刺激分子的受体或人工改造的结合分子。

9.根据权利要求1-8中至少一项的方法在测定细胞样品中干细胞的分化状态中的用途。

10.包含一种或多种标记缀合物的标记混合物，所述标记缀合物各自包含至少一个检测部分和至少一个针对CD14、CD235a和CD15的抗原识别部分。

11.用于检测分化的造血干细胞的试剂盒，其包含具有至少一种生长因子的细胞培养基和包含一种或多种标记缀合物的标记混合物，所述标记缀合物各自包含至少一个检测部分和至少一个针对CD14、CD235a和CD15的抗原识别部分。