[发明专利]用于检测转基因事件的多核苷酸、引物和方法，遗传构建体，用于检测来自植物样品的材料的试剂盒，事件CTC91087-6，抗虫甘蔗植物，以及用于产生抗虫甘蔗植物、植物细胞、植物部分或种子的方法

说明书

本发明涉及生物技术领域。更确切地说，一种用于生产转基因植物事件，特别是甘蔗(Saccharum spp.)事件的基因构建体和方法，其抵抗害虫小蔗螟(Diatraea saccharalis)的侵染，后者作为害虫被广泛知晓，描述为普通螟虫、甘蔗螟虫，或仅称为螟虫。本发明描述了该事件、事件鉴定的方法，以及插入检测方法，以在插入部分和宿主基因组之间交叉的独特区域和特征性的侧翼区域为基础。

技术领域

本发明涉及生物技术领域。更具体地说，描述了一种用于生产转基因植物事件，特别是甘蔗(Saccharum spp.)事件的基因构建体和方法，该事件表达了赋予对害虫小蔗螟(Diatraea saccharalis，俗称普通螟虫、甘蔗螟虫，或仅称为螟虫)侵染抗性的Cry1Ac毒素。本发明描述了一种检测抗甘蔗螟虫侵染的事件和来自该事件的材料，以及识别这种事件的多核苷酸、引物、探针和侧翼区的方法。本发明具体地涉及用于检测转基因事件、基因构建体的多核苷酸、引物和方法，从植物样本中检测材料的试剂盒，事件CTC91087-6，抗虫甘蔗植株，以及生产抗虫甘蔗的植株、植物细胞、植物部分或种子的方法。

背景技术

甘蔗(Saccharum spp.)是一种属于植物禾本科的草本植物，原产于东南亚，更精确地说，是产于新几内亚和印度尼西亚的广大中部地区。它是热带和亚热带地区生长的最重要的植物品种之一，其面积超过2,300万公顷，分布在121个国家(粮农组织2012年统计年鉴第233页)。

甘蔗是生产糖、酒、糖蜜、朗姆酒、卡莎萨(巴西的国家蒸馏酒)和燃料乙醇的原材料来源。甘蔗碾磨后产生的甘蔗渣可用于打捆、提供热能、在工厂加工、生产电力(通常卖给用户电网)，或作为生产甘蔗第二代乙醇的原料(BR 11 2014 02385-1)。因此，甘蔗农业产业通过由糖和乙醇的商业化以及植物生物质的可持续优化利用为该地区创造了数百万个工作岗位，并促进了外汇的增长，具有巨大的经济和社会意义。

最近，随着全球变暖的出现，以及随之而来的对化石燃料(生物燃料)替代品的渴望，全世界对甘蔗的兴趣大大增加。以甘蔗为基础的乙醇作为一种可再生能源，被认为对减少温室气体和对化石燃料的依赖极为重要，从而使其成为控制全球气候变化的一个关键因素(Savage，2011年)。

由于甘蔗的经济和社会意义，越来越多的研究被用于确定甘蔗种植的最佳农业实践和提高种植品种的质量。改善甘蔗农艺特性的努力集中在提高糖的产量和积累、提高对生物和非生物胁迫的耐受性、对病虫害和病原体的抗性和耐受性，以及开发利用木质纤维素生物质生产甘蔗乙醇的替代技术(PI 0802153-8；PI 0904538-4；PI 1101295-1)。

现代甘蔗品种的多倍体和非整倍体基因组的复杂性，连同其相对有限的遗传基础和低生育率，给利用常规育种选择具有合乎需求的农艺特性的植株带来了很大的困难和许多限制(Souza等人，2011年；D′Hont和Glaszmann，2005年，Basel，第109卷，第1-3期，第27-33页；Cheavegatti-Gianotto等人，2011年)。因此，生产成本高、必须使用手工劳动、产品上市时间线长，可能会阻碍甘蔗产业满足全球市场日益增长的需求。

由于传统育种方法的局限性，以及对快速有效纳入合乎需求的性状的日渐增长的需求，基因工程(生物技术)在甘蔗育种计划中的应用已经变得越来越突出，特别是由于通过基因工程整合合乎需求的农艺性状在其他植物品种(例如大豆、玉米、油菜籽、甜菜和棉花)获得了商业成功。

植物基因工程涉及将目的基因转移到植物细胞中(基因转化)，以这样的方式：使可育性和农艺上优越的后代保持并稳定地表达负责所需性状的基因。