[发明专利]去表位的α-麦醇溶蛋白及其在乳糜泻和麸质敏感性管理中的用途

权利要求书

1.一种对α-麦醇溶蛋白进行去表位的方法，所述α-麦醇溶蛋白包含具有如QLPYPQP(SEQ ID NO：90)、QLPYSQP(SEQ ID NO：91)和/或PLPYPQP(SEQ ID NO：92)所示的氨基酸序列的抗原单元，所述方法包含用选自由带正电荷的氨基酸、脯氨酸和脂肪族氨基酸组成的组的氨基酸取代所述抗原单元的位置1处的氨基酸残基；以及在所述抗原单元的位置4或5处再取代至少一个氨基酸残基，从而生成去表位的α-麦醇溶蛋白。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述去表位的α-麦醇溶蛋白不包含以小于30μM的IC50与MHC类型DQ2或DQ8结合的15聚体肽。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述去表位的α-麦醇溶蛋白包含如SEQ ID NO：60至80所示的氨基酸序列。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述去表位的α-麦醇溶蛋白包含如SEQ ID NO：49至58所示的氨基酸序列。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述取代在所述抗原单元的至少两个上进行。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述取代在所述抗原单元的至少三个上进行。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述方法包含在所述抗原单元的位置1、4和5处取代所述氨基酸残基。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中在所述抗原单元的位置1处的所述取代包含用带正电荷的氨基酸进行的替换。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述带正电荷的氨基酸是组氨酸或赖氨酸。

10.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中在所述抗原单元的位置4处的所述取代包含用脯氨酸、脂肪族氨基酸、极性氨基酸或甘氨酸的取代。

11.根据权利要求10所述的方法，其中在位置4处的所述取代包含用脯氨酸进行的替换。

12.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中在所述抗原单元的位置5处的所述取代包含用小氨基酸、极性氨基酸或芳香族氨基酸进行的替换。

13.根据权利要求12所述的方法，其中在位置5处的所述取代包含用小氨基酸进行的替换。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述小氨基酸包含甘氨酸或丝氨酸。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法，其进一步包含用芳香族或极性氨基酸取代所述抗原单元的位置3处的所述氨基酸残基。

16.一种生成去表位的α-麦醇溶蛋白的方法，所述方法包含在所述α-麦醇溶蛋白的氨基酸57和氨基酸89之间的位置突变一个或多个氨基酸残基，其中突变中的至少一个在选自由63、64、66、68、69、70、72、73、75、76、77、78、80、81、82、83和84组成的组中的位置的氨基酸上实现，从而生成所述去表位的α-麦醇溶蛋白，其中所述突变的位置根据SEQ ID NO：32中所示的野生型α-麦醇溶蛋白的氨基酸序列。

17.根据权利要求1至16中任一项所述的方法，其中所述去表位不降低所述α-麦醇溶蛋白的变应原性。

18.根据权利要求1至16中任一项所述的方法，其中所述α-麦醇溶蛋白包含与SEQ IDNO：32、81、82、83、84、85、86、87、88或89所示的序列至少50％相同的氨基酸序列。