[发明专利]非洲猪瘟疫苗

说明书

本发明提供了非洲猪瘟病毒(ASFV)亚基疫苗，其包含：(i)一种或多种重组多核苷酸，该一种或多种重组多核苷酸编码如SEQ ID NO:1、2和3所示的多肽或其免疫原性片段；或与SEQ ID NO:1、2或3之一具有至少70％序列同一性的变体；其中由一种或多种重组多核苷酸编码的不同ASFV多肽的总数为10种或更少；或者(ii)如SEQ ID NO:1、2和3所示的重组多肽或其免疫原性片段；或与SEQ ID NO:1、2和3之一具有至少70％序列同一性的变体；其中疫苗包含10种或更少的不同ASFV多肽。

技术领域

本发明涉及用于治疗和/或预防非洲猪瘟的疫苗。

发明背景

非洲猪瘟(ASF)是由双链DNA病毒，非洲猪瘟病毒(ASFV)引起的家猪的毁灭性出血疾病。ASFV是非洲猪瘟病毒科(Asfarviridae)中唯一主要在细胞质中复制的成员。ASFV的强毒株可在感染后约5-14天内杀死家猪，死亡率接近100％。

目前没有ASF的治疗方法。非洲以外的国家已经尝试在全国范围内通过限制进口猪和猪肉产品、在饲喂猪前强制煮沸获得许可的废弃动物产品、以及在诊断出疾病时实施屠宰政策等方式进行预防。在非洲，预防由野生动物的传播基于让疣猪和被疣猪污染的材料远离猪群的措施。在家猪群中的传播基于良好的生物安全措施以及在受影响的农场实施猪的检疫和屠宰。

迄今为止，没有开发出有效的减毒或灭活病毒疫苗(参见http://www.thepigsite.com/pighealth/article/441/african-swine-fever-asf)。

通过使用从软蜱中回收的低毒力ASFV毒株OURT88/3，对致死性攻击的实验性保护成为可能。OURT88/3是来自葡萄牙的ASFV的非致病性分离物。先前的ASFV OURT88/3感染已显示出可以对相关毒性病毒的攻击提供保护(Boinas等人(2004)J Gen Virol 85:2177-2187；Oura等人(2005)J.Gen.Virol.86:2445-2450)。此外，一些基因缺失的病毒也能有效地诱导对攻击的保护(例如BeninΔMGF和BeninΔDP148R)。

尽管这些病毒已显示出在某些动物中诱导保护性免疫应答，但这种效果似乎并不普遍。该免疫作用似乎不能有效地保护一些猪免受随后的攻击。其还可能与一些猪的不良临床反应的诱导有关，例如发烧或关节肿胀。

包含ASFV多肽的亚基组合物诱导针对ASFV的防护的能力也已得到研究。然而，这些研究已确定，ASFV多肽诱导免疫原性应答的能力不一定能预测其诱导对ASFV攻击的防护的能力(参见Neilan等人；Virology；319(2)；337-342；2004)。此外，ASFV多肽可能只有在特定的组合中使用时才能诱导防护作用。例如，Neilan等人(如上)报道p30、p54、p72和p22的组合不足以诱导防护作用。相比之下，Argilaguet等人(Antiviral Res；98(1)；61-65；2013)报道，p30、p54和EP402R的组合在DNA疫苗接种实验中对ASFV具有部分防护作用。

因此需要替代措施来控制ASFV感染并防止疾病的传播。

发明概述

本发明人确定了三种ASFV多肽的最小组合，其在ASFV攻击之前施用时能够诱导针对ASFV的可重复防护作用。发明人已经确定，当不存在这三种ASFV多肽中的任何一种时，均不能诱导防护作用。此外，发明人已经证明，这三种ASFV多肽的最小组合可以与另外的ASFV多肽组合以提供改进的疫苗组合物，以用于诱导针对ASFV攻击的可靠防护以及ASF的治疗和/或预防。