[发明专利]用于改善阿卡波糖形成的方法在审
| 申请号： | 202080072811.6 | 申请日： | 2020-10-02 |
| 公开（公告）号： | CN114555811A | 公开（公告）日： | 2022-05-27 |
| 发明（设计）人： | A·普勒;J·卡利诺夫斯基;S·施内克-贝克尔;M·佩尔斯克;L·谢弗特 | 申请（专利权）人： | 拜耳公司 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74;C12N1/21;C12P19/26;C12N15/31;C12N15/54;C12N15/60;C12R1/045 |
| 代理公司： | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人： | 邰红;徐志明 |
| 地址： | 德国勒*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 改善 阿卡波糖 形成 方法 | ||
1.一种工程化放线菌目菌株用于改善阿卡波糖产生的方法，所述放线菌目菌株优选游动放线菌属菌株，所述方法包括对所述放线菌目菌株工程化以
(i)使根据SEQ ID No.20的细胞外小碳水化合物结合蛋白Cgt的表达不存在或降低，和/或
(ii)使类胡萝卜素合成所必需的至少一个基因的表达不存在或降低，和/或，
(iii)过表达根据SEQ ID No.13的dTDP-D-葡萄糖-4,6-脱水酶AcbB，和/或
(iv)过表达根据SEQ ID No.19的UDP-葡萄糖-1P尿苷酰转移酶GtaB。
2.根据权利要求1所述的方法，所述方法包括
(i)编码根据SEQ ID No.20的细胞外小碳水化合物结合蛋白Cgt的基因的缺失或突变，和/或
(ii)在类胡萝卜素合成中所必需的至少一个基因的缺失或突变，和/或
(iii)将包含AcbB的表达盒的载体引入所述放线菌目菌株中，和/或
(iv)将包含GtaB的表达盒的载体引入所述放线菌目菌株中。
3.根据权利要求2所述的方法，其中根据(iii)和/或(iv)的所述表达盒在中等强启动子或强启动子的控制下，所述中等强启动子的特征在于在葡糖醛酸糖苷酶测定中，标准化的葡糖醛酸糖苷酶活性为至少1×10-4[L·g-1·min-1]，所述强启动子的特征在于在葡糖醛酸糖苷酶测定中，标准化的葡糖醛酸糖苷酶活性为至少5×10-4[L·g-1·min-1]。
4.一种用于生产阿卡波糖的放线菌目菌株，优选游动放线菌属菌株，其中所述放线菌目菌株经遗传工程化以使根据SEQ ID No.20的细胞外小碳水化合物结合蛋白Cgt的表达不存在或降低。
5.根据权利要求4所述的放线菌目菌株，其中所述放线菌目菌株是cgt缺失突变体。
6.一种用于生产阿卡波糖的放线菌目菌株，优选游动放线菌属菌株，其中所述放线菌目菌株经遗传工程化以使类胡萝卜素合成所必需的至少一个基因的表达不存在或降低。
7.一种用于生产阿卡波糖的放线菌目菌株，优选游动放线菌属菌株，其中所述放线菌目菌株经遗传工程化以过表达根据SEQ ID No.13的dTDP-D-葡萄糖-4,6-脱水酶AcbB。
8.一种用于生产阿卡波糖的放线菌目菌株，优选游动放线菌属菌株，其中所述放线菌目菌株经遗传工程化以过表达根据SEQ ID No.19的UDP-葡萄糖-1P尿苷酰转移酶GtaB。
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