[发明专利]复制增强的溶瘤腺病毒

说明书

本发明公开了复制增强的溶瘤腺病毒。这些溶瘤腺病毒具有能够增强肿瘤溶瘤和增强治疗性转基因表达的肿瘤特异性复制能力。还公开了方法，包括对患有癌症的患者给药复制增强的溶瘤腺病毒。

联合研究协议

本发明是在联合研究协议范围内开展的活动的结果，该协议在本发明做出时生效。上述联合研究协议的双方为曼珍公司(Memgen，Inc.)(前身为Memgen，LLC)和H·李·莫菲特癌症中心和研究所公司(H.Lee Moffitt Cancer Center and Research Institute,Inc.)。

发明背景

发明领域

本发明通常涉及溶瘤病毒和肿瘤学领域。更具体地，本发明涉及用于治疗癌症的在肿瘤细胞中具有增强的病毒复制的溶瘤病毒组合物。

现有技术描述

溶瘤病毒是一类具有双重作用机制的癌症治疗剂：1)通过肿瘤细胞中的选择性病毒复制杀死肿瘤细胞，导致直接的肿瘤溶解；2)通过从被破坏的肿瘤细胞中释放抗原诱导全身抗肿瘤免疫。原生病毒和基因修饰病毒都在研发中。美国FDA于2015年批准了第一种溶瘤病毒talimogene laherparepvec(IMLAmgen Inc.，Thousand Oaks，CA)，一种用于黑色素瘤局部治疗的编码粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的基因修饰的疱疹病毒，如Kohlhapp等人于2016年临床癌症研究所述的。然而，疱疹病毒只是正在对其溶瘤特性进行研究的许多溶瘤病毒中的一种。

溶瘤腺病毒载体因几种原因被广泛用于癌症基因治疗，包括多种肿瘤类型感染的广泛倾向性、载体稳定性、高滴度制造和纯化病毒的能力、转基因携带能力、缺乏与宿主基因组的整合以及良好的安全性特征。

尽管溶瘤腺病毒载体具有这些理想的属性，但由于多种原因，这些载体在癌症治疗中的应用也受到限制，包括正常细胞中的非特异性感染和复制、缓慢或低的病毒复制率、抗腺病毒免疫原性导致的载体清除和中和，以及低溶瘤能力。当用作递送载体时，这些限制也会导致基因转移或表达效率低下。

这些努力的目的是改善具有复制能力的腺病毒，以解决其局限性。这些努力包括修饰腺病毒基因组组分，以在肿瘤细胞中进行选择性复制。特征明确的修饰包括腺病毒E1A基因(δ-24E1A)的24碱基对缺失、E1B 55K病毒基因的缺失，甚至用肿瘤相关抗原启动子(如甲胎蛋白启动子或前列腺抗原启动子)替换病毒启动子(如E1A)。

尽管有这些选择性肿瘤靶向的实例，但现有技术缺乏在肿瘤细胞中以显著提高的速率或水平复制的重组腺病毒载体。

因此，仍然需要溶瘤病毒载体来改善其主要作用机制之一：选择性增强肿瘤细胞中的病毒复制，从而改善肿瘤溶解。本发明解决了对溶瘤腺病毒载体的这种需求，该载体具有增强的肿瘤细胞中的病毒复制、改进的肿瘤溶解和改进的治疗性转基因表达。

背景中讨论的所有主题不一定都是现有技术，也不应仅仅因为背景中的讨论而被假定为现有技术。沿着这些路线，对背景中讨论的现有技术中的问题或与此类主题相关的问题的任何承认不应被视为现有技术，除非明确声明为现有技术。相反，在背景中对任何主题的讨论都应该被视为发明人解决特定问题的方案的一部分，这本身也可能具有创造性。

发明内容

以下为本发明的简要概述，以提供对本发明某些方面的基本理解。该内容并非对本发明的详尽概述。其目的不是确定本发明的关键或关键要素，或描述本发明的范围。其唯一目的是以简化的形式呈现一些构思，作为后面讨论的更详细描述的序幕。