[发明专利]用于递送至肝脏的GalNAc-寡核苷酸偶联物及其制备方法

权利要求书

1.一种具有预期在肝实质细胞中具有药理作用的核酸序列的寡核苷酸与双触角GalNAc单元的偶联物或其药学上可接受的盐，其中，在所述偶联物中，所述双触角GalNAc单元由下式表示并且与所述寡核苷酸的5'端或3'端结合，并且

其中所述偶联物在体内特异性递送至肝实质细胞：

[式1]

其中W是由下式表示的基团：

[式2]

G表示5-乙酰氨基-2-羟甲基-3,4-二羟基四氢吡喃-6-基(GalNAc)；Z表示氧原子或硫原子；L¹和L²中的一个表示亚甲基(CH₂)，并且另一个表示不插入原子；o、q、r和s各自独立地表示0或1；n表示1至15的整数；m表示0至5的整数；并且v表示1至7，条件是n为1时，则m为0至5的整数，并且n为2至15的整数时，则m为0。

2.根据权利要求1所述的偶联物或其药学上可接受的盐，其中所述双触角GalNAc单元的式中的o和q各自为0。

3.根据权利要求1或2所述的偶联物或其药学上可接受的盐，其中所述双触角GalNAc单元与所述寡核苷酸的5'端结合。

4.根据权利要求1所述的偶联物或其药学上可接受的盐，其中所述双触角GalNAc单元为由下式中任一项表示的基团：

[式3]

[式4]

[式5]

[式6]

[式7]

。

5.一种药物，包含根据权利要求1至4中任一项所述的偶联物或其药学上可接受的盐。

6.一种制备寡核苷酸与GalNAc单元的偶联物的方法，包括以下步骤：

a：合成包含由下式表示的含有疏水性保护基团的GalNAc单元-磷酸酯基团与所述寡核苷酸的5'端或3'端结合的结构的偶联物：

[式8]

其中，R^a、R^b和R^c中的至少一个为疏水性保护基团，并且其余为氢原子或在游离条件下会被去除的保护基团；X₁和X₂各自独立地表示接头结构，其可以在X₁和X₂之间分支；t为所述接头结构中支链的数量，并且为1至10的整数；以及Y表示通过磷酸酯基团或硫代磷酸酯基团与寡核苷酸结合的键；

b：使含有步骤a的产物的溶液通过填充有由于疏水相互作用而具有吸附性的树脂的柱，并且使水性洗涤溶液通过所述柱；和

c：在步骤b之后从所述柱上洗脱寡核苷酸。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其中所述疏水性保护基团是在碱性条件或酸性条件下被去除的保护基团。

8.根据权利要求6所述的制备方法，其中包含含有疏水性保护基团的GalNAc单元-磷酸酯基团的所述结构与位于所述寡核苷酸的5'端处的核苷的5'-羟基结合。

9.根据权利要求6所述的制备方法，其中，在包含含有疏水性保护基团的GalNAc单元-磷酸酯基团的所述结构中，R^a为疏水性保护基团，R^b和R^c各自为氢原子，t为1至3的整数。

10.根据权利要求6所述的制备方法，其中由于疏水相互作用而具有吸附性的所述树脂为选自苯乙烯-二乙烯基苯吸附树脂、苯乙烯-二乙烯基苯改性吸附树脂、甲基丙烯酸类吸附树脂和酚醛吸附树脂中的任一种。

11.根据权利要求6所述的制备方法，其中填充有由于疏水性相互作用而具有吸附性的树脂的所述柱是离子交换柱或反相柱。