[发明专利]因子VIII多肽

权利要求书

1.包含因子VIII氨基酸序列的因子VIII多肽，其中所述因子VIII氨基酸序列包含一个或多个取代突变，其中所述一个或多个取代突变包含对应于SEQ ID NO：1的M662的氨基酸的取代，其中所述一个或多个取代突变不包括M662C取代。

2.权利要求1的因子VIII多肽，其中：

(i)因子VIII多肽相对于参考野生型因子VIII多肽具有更高的比活性；和/或

(ii)因子VIII多肽相对于参考野生型因子FVIII多肽具有更高的稳定性；和/或

(iii)因子VIII多肽相对于参考野生型因子VIII多肽具有更长的半衰期，任选地其中当被活化时，因子VIII多肽相对于参考野生型因子VIII多肽具有更长的半衰期；和/或

(iv)因子VIII多肽在宿主细胞中以比参考野生型因子VIII多肽更高的水平表达。

3.权利要求2的因子VIII多肽，其中所述因子VIII多肽的比活性是参考因子VIII多肽的比活性的至少1.1倍、至少1.2倍、至少1.5倍、至少1.7倍、至少1.8倍、至少2倍、至少2.2倍、至少2.5倍、至少3倍、至少3.5倍、至少4倍、至少4.5倍、至少5倍或至少5.5倍。

4.权利要求2或3的因子VIII多肽，其中所述因子VIII多肽具有更长的半衰期，其为参考野生型因子VIII多肽的半衰期的至少1.1、至少1.2、至少1.5、至少1.7、至少1.8、至少2、至少2.2、至少2.5、至少2.8或至少3倍，和/或其中当被活化时，所述因子VIII多肽的半衰期是参考野生型因子VIII多肽的半衰期的至少1.1、至少1.2、至少1.5、至少1.7、至少1.8、至少2、至少2.2、至少2.5、至少2.8或至少3倍，任选地，其中更长的半衰期是血浆中更长的半衰期。

5.权利要求2至4中任一项的因子VIII多肽，其中：

(i)表达的因子VIII多肽的水平是宿主细胞分泌的FVIII多肽的水平，任选地其中宿主细胞是人肝细胞，任选地其中人肝细胞是Huh7细胞；和/或

(ii)表达的因子VIII多肽的水平是体内表达。

6.权利要求2至5中任一项的因子VIII多肽，其中与包含因子VIII多肽的因子VIII氨基酸序列但不包含一个或多个取代突变的参考因子VIII多肽相比，所述因子VIII多肽具有更高的比活性和/或更高的稳定性和/或在宿主细胞中以更高的水平表达，任选地其中参考因子VIII多肽是SEQ ID NO：1、3或5的因子VIII多肽。

7.权利要求1至6中任一项的因子VIII多肽，其中所述一个或多个取代突变包括用色氨酸、酪氨酸、异亮氨酸、亮氨酸或苯丙氨酸取代甲硫氨酸。

8.权利要求1至7中任一项的因子VIII多肽，其中所述一个或多个取代突变包括用芳香族氨基酸取代对应于SEQ ID NO：1的M662的氨基酸。

9.权利要求1至8中任一项的因子VIII多肽，其中所述一个或多个取代突变包括M662W取代。

10.权利要求1至9中任一项的因子VIII多肽，其中所述一个或多个取代突变包括M662W和H693W取代。

11.权利要求1至10中任一项的因子VIII多肽，其中所述一个或多个取代突变不抑制因子VIII多肽的活化。

12.权利要求1至11中任一项的因子VIII多肽，其中所述因子VIII氨基酸序列包含与SEQ ID NO：1、3或5所示的氨基酸序列至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％相同的氨基酸序列，或与包含SEQ ID NO：1、3或5的至少1349个氨基酸的氨基酸序列至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％相同的氨基酸序列。