[发明专利]胶原蛋白生产

说明书

本发明提供了一种增加细胞中胶原蛋白生产的方法和一种抑制细胞迁移的方法。此外，本发明提供了一种包含脂肽的药物组合物，其中所述脂肽基本上由ETTES脂肽组成，并还提供了所述药物组合物的用途。本发明还提供了一种包含脂肽的超分子结构，其中所述脂肽基本上由ETTES脂肽组成，并还提供了制备所述超分子结构的方法。本发明的超分子结构可以用于增加胶原蛋白生产的方法和/或抑制细胞迁移的方法中。

技术领域

本发明提供了一种增加细胞中胶原蛋白生产的方法和一种抑制细胞迁移的方法。此外，本发明提供了包含脂肽的药物组合物，其中所述脂肽基本上由ETTES脂肽组成，以及所述药物组合物的用途。本发明还提供了包含脂肽的超分子结构，其中所述脂肽基本上由ETTES脂肽组成，以及制备所述超分子结构的方法。本发明的超分子结构可以用于增加胶原蛋白生产的方法和/或抑制细胞迁移的方法。

背景技术

结缔组织(如角膜、肌肉、皮肤、软骨和骨骼)的再生既取决于健康的细胞外基质(ECM)(包括胶原蛋白)的重新沉积，也取决于具有组织特异性表型的驻留细胞的维持。一些肽两亲物(PA)分子，也称为脂肽，已被证明为适用于临床过程的潜在候选物，其允许组织特异性细胞修复和再生ECM，而同时防止疤痕(scar)组织的形成。

PA是合成材料，针对其在生理pH下水性介质中自组装成高度有序的纳米结构的能力进行使用。一些这些纳米结构已被证明对细胞活力和/或蛋白质表达具有独特的影响。例如，以商品名Matrixyl使用的C₁₆-KTTKS脂肽已证实在体外刺激角膜和皮肤成纤维细胞中的胶原蛋白生产(Jones et al.，2013)。

本发明旨在提供具有多种潜在应用，例如，在损伤后的角膜组织再生、体外组织生物制造或皮肤护理中的替代和/或改进的PA。

发明内容

本发明基于发明人的惊人发现，即C₁₆-ETTES脂肽具有许多意想不到的用途和优点。

C₁₆-ETTES脂肽以前被认为是生物惰性的，并已被用作非生物活性稀释剂分子，以通过将脂肽与生物活性部分(如细胞粘附部分，例如，RGD或RGDS)共组装而帮助细胞附着。

作为稀释剂，C₁₆-ETTES脂肽能够改变由组装的脂肽形成的超分子结构内的生物活性部分的密度。C₁₆-ETTES脂肽的功能性氨基酸序列最初被合理设计为一种非生物活性稀释剂分子，能够优化其他相邻脂肽分子之间的距离(Castellettoet.al.，2013)。这表明，通过使用C₁₆-ETTES脂肽，可以改变具有细胞粘附部分如RGD或RGDS的相邻脂肽之间的距离，这可以改善细胞与细胞粘附部分的附着。随后将包含C₁₆-ETTES脂肽的脂肽混合物用于2D人角膜基质成纤维细胞(hCSF)的附着和生长之用的RGDS:ETTES涂层。该涂层已被描述为不仅可以作为hCSF粘附的支撑物，而且还可以作为调节细胞表型和防止无血清条件下细胞死亡的效应器。具体而言，结果表明，RGDS:ETTES涂层不仅增加了hCSF的粘附和增殖，而且还增强了无血清条件下长时间培养而生长的hCSF的分子和形态表型特征。在这种类型的涂层中，C₁₆-ETTES脂肽仅用作稀释剂分子，但未显示具有任何生物活性功能。

令人惊讶的是，本发明人发现，细胞在存在C₁₆-ETTES脂肽的情况下培养，会增加细胞生产的胞外基质如胶原蛋白的量。本发明人在诸如基质细胞(例如，角膜基质细胞)、脂肪衍生间充质干细胞(hASC)和成肌细胞等细胞中观察到了这种有益效果。不希望受限于特定假设，本发明人相信，C₁₆-ETTES脂肽能够通过为胞外胶原纤维化提供成核点和/或通过充当细胞受体(例如，光感受器间基质蛋白聚糖1受体(IMPG1))的配体增加胞外基质(例如，胶原蛋白)生产。此外，本发明人还发现，细胞在C₁₆-ETTES脂肽存在下培养，可以抑制细胞迁移。本发明人相信，增加胶原蛋白生产和减少细胞迁移之间可能存在直接关系。