[发明专利]用于靶向的货物递送的生物功能化巨型单层囊泡的微流体生产

权利要求书

1.一种用于制备单分散的靶向细胞的巨型单层囊泡的方法，包括以下步骤：

a)提供直径在1μm和100μm之间的聚合物壳稳定的巨型单层囊泡，

b)通过使用包括多Y形分割区(7)的微流体装置，将聚合物壳稳定的巨型单层囊泡机械对称地分割成两个较小的聚合物壳稳定的巨型单层囊泡，而不损害巨型单层囊泡，

c)通过机械对称地分割步骤b)中提供的较小的聚合物壳稳定的巨型单层囊泡重复步骤b)，直到聚合物壳稳定的巨型单层囊泡达到1和10μm之间的所需直径，和

d)任选地从步骤c)中获得的聚合物壳稳定的巨型单层囊泡中去除聚合物壳，

其中单分散是指囊泡尺寸均匀，其显示低于16％的尺寸变异系数，

其中直径是通过共聚焦显微术测量的，并且

其中对称地分割是指较小囊泡的摩尔百分比变化小于5％，并且囊泡的腔内含物变化小于20％，其中所述腔内含物的变化计算为标准偏差/平均荧光*100。

2.根据权利要求1所述的方法，其中步骤a)中提供的聚合物壳稳定的单层囊泡是通过以下步骤获得的：

a')合并包含至少一种脂质的水相和包含式(I)的表面活性剂的油相：

其中m介于5和150之间，并且其中n介于5和450之间，并且

其中油相由全氟化水不混溶溶剂的溶液组成，

以形成聚合物壳稳定的巨型单层囊泡，和

a)任选地将一种或多种蛋白质或其片段整合到步骤a')中提供的聚合物壳稳定的巨型单层囊泡中。

3.根据权利要求1所述的方法，其中步骤a)中提供的聚合物壳稳定的单层囊泡是通过以下步骤获得的：

a')合并包含至少一种脂质和阳离子的水相和包含两亲共聚物的油相以形成聚合物壳稳定的巨型单层囊泡，其中油相由全氟化水不混溶溶剂的溶液组成；和

a)任选地将一种或多种蛋白质或其片段整合到步骤a')中提供的聚合物壳稳定的巨型单层囊泡中。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中步骤d)包括通过添加去稳定剂从步骤c)中获得的聚合物壳稳定的巨型单层囊泡中去除聚合物壳，其中所述去稳定剂是能够去稳定化聚合物壳的结构的去乳化剂表面活性剂。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，还包括在步骤d)之后的以下步骤e)：

e)通过离心纯化巨型单层囊泡。