[发明专利]一种收集IVF-ET患者胚胎培养液的方法及其应用

说明书

本发明提供了一种收集常规IVF‑ET患者胚胎培养液的方法，为非ICSI患者提供无创性评估胚胎质量的可能性，既有助于减少不必要的侵袭性操作如ICSI，同时有助于提高助孕技术的安全性。

技术领域

本发明具体涉及一种收集IVF-ET患者胚胎培养液的方法及其应用。

背景技术

精准选择优质胚胎进行宫腔内移植是提高人类辅助生殖技术治疗效果和安全性的一个有效措施。但是传统的胚胎评估方法或仅凭肉眼判断，主观成分较大；亦或需要对胚胎进行有创操作，造成胚胎损伤。因此临床实践中仍需探寻一种高效、精准的无创性胚胎检测方法。目前，临床中尝试通过对胚胎培养液的各种物质进行检测(包括基因层面及蛋白代谢层面)，实现无创性预判胚胎发育潜能。但是既往研究中，为避免受精过程中，包裹受精卵的颗粒细胞对于培养液成分的干扰，进行培养液物质检测时必须采用卵胞浆内单精子显微注射技术(introcytoplasmic sperm injection，ICSI)，即通过有创的方式将精子直接注入卵母细胞胞浆内。其实自ICSI技术诞生至今，关于此技术安全性的争议就从未停止。作为一项人为的体外操作，其远期安全性仍然有待评估。这一局限性不仅致使较大一部分接受常规体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer，IVF-ET)的患者不能进行无创性胚胎评估，更有可能因为无创评估而增加不必要的ICSI操作，从而引起无法预期的后果。

发明内容

针对于背景技术中存在的问题与限制，本发明的目的在于提供一种收集IVF-ET患者胚胎培养液的方法。

本发明所提供的一种收集IVF-ET患者胚胎培养液的方法，包括体外受精后第一天，将所有胚胎先于冲洗液中进行冲洗，后将冲洗后的胚胎置于生长液中单滴单胚胎培养，之后将胚胎转移至囊胚培养液中继续单滴单胚胎培养后，单样本单管收集囊胚培养液即得到IVF-ET患者胚胎培养液。

上述方法中，将所有胚胎先于冲洗液中进行冲洗可通过反复吹打进行。

上述方法中，所述冲洗可在培养皿中进行。

上述方法中，所述胚胎置于生长液中单滴单胚胎培养，培养时间为48±2小时，优选为48小时。

上述方法中，所述胚胎置于生长液中单滴单胚胎培养可在培养皿中进行。

上述方法中，所述将胚胎转移至囊胚培养液中继续单滴单胚胎培养，培养时间为72±2小时，优选为72小时。

上述方法中，所述将胚胎转移至囊胚培养液中继续单滴单胚胎培养可在培养皿中进行。

上述方法中，所述单滴单胚胎培养，培养条件为体积百分含量(6±0.2)％的CO₂、体积百分含量(5±0.2)％的O₂；优选为体积百分含量6％的CO₂、体积百分含量5％的O₂。

上述收集IVF-ET患者胚胎培养液的方法在无创评价胚胎质量中的应用属于本发明的保护范围。

上述收集IVF-ET患者胚胎培养液的方法在无创评价胚胎发育潜能中的应用也属于本发明的保护范围。

本发明所提供的一种收集常规IVF-ET患者胚胎培养液的方法，为非ICSI患者提供无创性评估胚胎质量的可能性，既有助于减少不必要的侵袭性操作如ICSI，同时有助于提高助孕技术的安全性。

附图说明

图1为本发明实施例1冲洗皿、生长皿和囊胚培养皿中胚胎的分布的示意图。其中，1-9每个数字代表一个单滴单胚胎。

具体实施方式