[发明专利]脊髓亚急性联合变性病模型的制备方法

说明书

本发明公开了脊髓亚急性联合变性病模型的制备方法，包括将10μl的六氯丁二烯稀释到490μl玉米油当中；按照150‑250μl/只小鼠的剂量，对小鼠进行灌胃或腹腔注射，用药期间正常进行饲养；间隔48小时再次进行灌胃或腹腔注射，共计给药三次；对小鼠进行测试，观察是否出现脊髓亚急性联合变性病的临床症状，包括以下几种方式：用药期间对小鼠的体重，每隔24小时进行测试并且记录，对小鼠进行行为学评测，评测内容包括但不限于：步态、爬杆、转棒和线栅实验，用药完成后测量小鼠血清维生素B₁₂的含量。通过上述设置，使用六氯丁二烯能够在6天内完成脊髓亚急性联合变性病模型的制备方法，且由于六氯丁二烯的售价低廉，因此本申请的制备方式相对于传统制备方式具有速度快和成本低的优点。

技术领域

本发明涉及医学生物学技术领域，具体为脊髓亚急性联合变性病模型的制备方法。

背景技术

脊髓亚急性联合变性简称亚急性联合变性，是由于维生素B₁₂的摄入、吸收、结合、转运或代谢障碍导致体内维生素B₁₂含量不足而引起的中枢和周围神经系统变性的疾病。病变主要累及脊髓后索、侧索及周围神经等，临床表现为双下肢深感觉缺失、感觉性共济失调、痉挛性瘫痪及周围性神经病变等，常伴有贫血的临床征象。

为了更好的对脊髓亚急性联合变性进行良好的研究，需要建立相应的动物模型。动物疾病模型主要用于实验生理学、实验病理学和实验治疗学（包括新药筛选）研究。借助于动物模型的间接研究，可以有意识地改变那些在自然条件下不可能或不易排除的因素，以便更准确地观察模型的实验结果并与人类疾病进行比较研究，有助于更方便、更有效地认识人类疾病的发生发展规律，研究防治措施。

现有的脊髓亚急性联合变性病动物模型的制备方式如下：通过在基因层面的操作，使得小鼠无法完成对维生素B₁₂的摄取，从而使得小鼠体内维生素B₁₂的含量不足，进而引发脊髓亚急性联合变性病。然而，这种制备方式用到的转基因小鼠价格昂贵并且在国内没有售卖，同时考虑到其制备周期在两个月左右，因此该制备方法具有制备时间长和制备成本高的缺点。

因此，急需一种能够快速且低成本制备脊髓亚急性联合变性病模型的方法。

发明内容

本发明的目的在于提供脊髓亚急性联合变性病模型的制备方法，通过六氯丁二烯能够在6天内完成脊髓亚急性联合变性病模型的制备方法，且由于六氯丁二烯的售价低廉，因此本申请的制备方式相对于传统制备方式具有速度快和成本低的优点。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：脊髓亚急性联合变性病模型的制备方法，包括以下步骤：

S1、将10μl的六氯丁二烯稀释到490μl食用油当中；

S2、按照50-250μl/只小鼠的剂量，对小鼠进行灌胃或腹腔注射，用药期间正常进行饲养；

S3、间隔48小时再次进行灌胃或腹腔注射，共计给药三次；

S4、在第三次给药24小时后对小鼠进行测试，观察是否出现脊髓亚急性联合变性病的临床症状。

优选的，所述食用油为玉米油。

优选的，S4步骤包括以下内容：用药期间对小鼠的体重，每隔24小时进行测试并且记录。

优选的，S4步骤包括以下内容：对小鼠进行行为学评测，评测内容包括但不限于：步态、爬杆、转棒和线栅实验。

优选的，用药完成后测量小鼠血清维生素B₁₂的含量。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：