[发明专利]一种鉴别新疆产甘草的SNP分子标记物及其方法与应用有效
申请号: | 202110005139.5 | 申请日: | 2021-01-05 |
公开(公告)号: | CN112322779B | 公开(公告)日: | 2021-04-16 |
发明(设计)人: | 王继永;郑司浩;曾燕;邓庭伟;刘美娟;尚兴朴;赵莎;王浩;孙文静;刘国城;静一;朱亚兵 | 申请(专利权)人: | 中国中药有限公司;深圳华大基因科技服务有限公司;国药种业有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6869;C12N15/11 |
代理公司: | 北京知联天下知识产权代理事务所(普通合伙) 11594 | 代理人: | 史光伟;张迎新 |
地址: | 100195 北京市海*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 鉴别 新疆 甘草 snp 分子 标记 及其 方法 应用 | ||
1.一种鉴别新疆产甘草的SNP分子标记物,其特征在于,所述分子标记物包括40个SNP分子标记,所述40个SNP分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.40所示,所述40个SNP分子标记的碱基分别位于SEQ ID NO.1~SEQ ID NO.40序列的第6位置处,40个SNP分子标记的碱基如下所示:。
2.一种利用鉴别新疆产甘草的SNP分子标记物鉴别甘草产地的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
获取待测样本DNA;
对检测合格的所述样本DNA进行建库测序,获得样本DNA测序数据;
对所述样本DNA测序数据进行质控,获得样本DNA质控数据;
将样本DNA质控数据序列与参考序列进行比对、去重后,进行SNP检测得到待测样品SNP基因;
将相同基因组位置处的所述待测样品SNP基因与权利要求1中新疆产甘草的SNP分子标记进行比对,判断是否有20个所述待测样品SNP基因与新疆产甘草的SNP分子标记SEQ IDNO.1-SEQ ID NO.20相同,同时判断是否有20个所述待测样品SNP基因与新疆产甘草的SNP分子标记SEQ ID NO.21-SEQ ID NO.40不同;
若两次判断结果均为有,则判断待测样品为新疆产地甘草;若任一次判断结果为没有,则所述待测样品为非新疆产地甘草。
3.根据权利要求2所述的利用鉴别新疆产甘草的SNP分子标记物鉴别甘草产地的方法,其特征在于,所述样本DNA的测序采用高通量测序。
4.根据权利要求2所述的利用鉴别新疆产甘草的SNP分子标记物鉴别甘草产地的方法,其特征在于,所述对所述样本DNA测序数据进行质控包括:
对所述样本DNA测序数据的原始reads进行过滤;
所述过滤规则包括:
去掉接头序列;
去掉序列中N的数量小于等于序列长度2%的reads;
去掉测序质量低于20的碱基数量超过序列长度的40%的reads。
5.根据权利要求2所述的利用鉴别新疆产甘草的SNP分子标记物鉴别甘草产地的方法,其特征在于,所述将样本DNA质控数据序列与参考序列进行比对、去重后,进行SNP检测得到待测样品SNP基因包括:
以甘草在公共数据库中的基因组作为参考序列,利用比对软件进行序列比对,获得bam文件;
利用排序软件对所述bam文件进行排序,并移除重复序列;
利用基因分型软件处理排序去重之后的bam文件,获得待测样本初步SNP基因型;
利用“QUAL100 FS10 MQ40”参数降低所述样本初步SNP基因型的错误率,得到待测样品SNP基因型。
6.一种利用权利要求1的SNP分子标记物在鉴别新疆产甘草中的应用。
7.一种含权利要求1所述的SNP分子标记物的基因芯片或试剂盒。
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