[发明专利]一种囊泡离心保护剂及其应用和离心提取囊泡的方法

权利要求书

1.一种囊泡离心保护剂在离心提取细胞囊泡或载药囊泡中的应用，其特征在于，所述囊泡离心保护剂由甘油和羧甲基纤维素钠组成；其中，在含有细胞囊泡或载药囊泡的细胞悬液中所述甘油的添加比例为3％wt-7％wt，所述羧甲基纤维素钠的添加比例为2％wt-8％wt。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，在含有所述细胞囊泡或所述载药囊泡的细胞悬液中所述甘油的添加比例为5％wt，所述羧甲基纤维素钠的添加比例为4％wt。

3.一种离心提取囊泡的方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1、向含有囊泡的细胞悬液中加入如权利要求1-2任一项所述的囊泡离心保护剂在离心提取细胞囊泡或载药囊泡中的应用中的囊泡离心保护剂，混匀得到混悬液；

S2、将所述混悬液在第一离心力下离心8-13min，然后取上清液在第二离心力下离心0.5-3min，之后取上清液在第三离心力下离心30-90min，沉淀即为囊泡；

其中，所述第一离心力＜所述第二离心力≤所述第三离心力。

4.根据权利要求3所述的离心提取囊泡的方法，其特征在于，所述含有囊泡的细胞悬液为含有细胞囊泡的细胞悬液或含有载药囊泡的细胞悬液。

5.根据权利要求4所述的离心提取囊泡的方法，其特征在于，所述含有细胞囊泡的细胞悬液的制备方法为：用化学、物理和/或生物方法诱导细胞发生凋亡，得到所述含有细胞囊泡的细胞悬液；

所述含有载药囊泡的细胞悬液的制备方法为：用化学、物理和/或生物方法诱导细胞发生凋亡，将凋亡细胞与有效量的药物孵育，得到所述含有载药囊泡的细胞悬液。

6.根据权利要求3-5任一项所述的离心提取囊泡的方法，其特征在于，所述第一离心力为1500-2500g，所述第二离心力为11000-30000g；所述第三离心力为11000-30000g。

7.根据权利要求6所述的离心提取囊泡的方法，其特征在于，步骤S2中，将所述混悬液在2000g离心力下离心10min，然后取上清液在14000g离心力下离心2min，之后取上清液在28000g离心力下离心30min，沉淀即为囊泡。