[发明专利]一种高效共聚集好氧反硝化组合菌剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种高效共聚集好氧反硝化组合菌剂，包括以下菌种：

门多萨假单胞菌IHB602、甲基杆菌DC-1和施氏假单胞菌IHB618。

2.如权利要求1所述的高效共聚集好氧反硝化组合菌剂，其特征在于，所述组合菌剂的共聚集制备过程包括以下步骤：

(1)将菌株置于DTM中生长，间隔6小时定期取样，测定OD₆₀₀值，并根据时间和OD₆₀₀值的关系绘制生长曲线图，在对数后期生长阶段收获菌液，离心，去除上清液，得到浓缩菌株；

(2)将浓缩菌株重悬于共聚集缓冲液中洗涤，得到含有菌株的悬浮液A；

(3)调节悬浮液A的吸光度值至OD₆₀₀＝1，得到悬浮液B；

(4)按照步骤(1)-(3)的方法，分别制得门多萨假单胞菌IHB602、甲基杆菌DC-1和施氏假单胞菌IHB618的悬浮液；

(5)将等体积的门多萨假单胞菌IHB602、甲基杆菌DC-1和施氏假单胞菌IHB618的悬浮液混合，并记录OD₆₀₀值；使用聚集指数计算共聚集的百分比，获得最优共聚集组合菌剂；

所述共聚集指数的公式为：

其中，A_t为静置时间为t小时的OD₆₀₀数值；A₀为静置时间为0时的OD₆₀₀数值。

3.如权利要求2所述的高效共聚集好氧反硝化组合菌剂，其特征在于，步骤(1)中，所述定期取样的时间间隔为6h。

4.如权利要求2所述的高效共聚集好氧反硝化组合菌剂，其特征在于，步骤(1)中，所述离心的具体过程为4000-10000g，10分钟；优选为在5000g下离心10分钟。

5.如权利要求2所述的高效共聚集好氧反硝化组合菌剂，其特征在于，步骤(2)中，所述共聚集缓冲液为CaCl₂、NaCl、Tris和MgCl₂的混合溶液。

6.如权利要求5所述的高效共聚集好氧反硝化组合菌剂，其特征在于，所述混合溶液中各物质的浓度为：1mM CaCl₂，150mM NaCl，10mM Tris，1mM MgCl₂。

7.如权利要求2所述的高效共聚集好氧反硝化组合菌剂，其特征在于，步骤(2)中，所述共聚集缓冲液的pH值为7.0。

8.如权利要求2所述的高效共聚集好氧反硝化组合菌剂，其特征在于，步骤(2)中，所述洗涤的次数为3-5次。

9.如权利要求1-8任一所述高效共聚集好氧反硝化组合菌剂在序批式生物膜反应器中的应用。

10.如权利要求9所述的高效共聚集好氧反硝化组合菌剂在序批式生物膜反应器中的应用方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：在生物膜反应器中添加菌株测量并分析生物膜的厚度和含量；

S2：通入废水，进行废水处理；

S3：在反应器稳定运行时，检测高效共聚集脱氮菌剂的丰度。