[发明专利]酰胺衍生物中性线粒体荧光标记物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种酰胺衍生物中性线粒体荧光标记物，其特征在于：所述酰胺衍生物的中性线粒体荧光标记物为式（I）-（IV）之一所示：

、、、；

其中，R¹、R²分别独立地选自氢或碳原子数为1～6的烷基；M、E¹、E²分别独立地选自碳原子数为1～6的烷基；n为1～3中任一整数。

2.根据权利要求1所述的酰胺衍生物中性线粒体荧光标记物，其特征在于：R¹、R²分别独立地选自氢或甲基；M为甲基；E¹和E²均为乙基；n为1或2。

3.一种权利要求1或2所述的酰胺衍生物中性线粒体荧光标记物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

在弱碱性条件和有机溶剂中，利用式（2）所示的化合物与式（1a-c）或式（1d-e）所示的化合物反应得到式（I）或式（II）所示的酰胺衍生物中性线粒体荧光标记物；或者

在弱碱性条件和有机溶剂中，利用式（3）所示的化合物与式（1a-c）或式（1d-e）所示的化合物反应得到式（III）或式（IV）所示的酰胺衍生物中性线粒体荧光标记物；

其中式（1a-c）、（1d-e）、（2）或（3）结构式分别如下：

、、、，

其中，R¹、R²分别独立地选自氢或碳原子数为1～6的烷基；M、E¹、E²分别独立地选自碳原子数为1～6的烷基；n为1～3中任一整数。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：反应均在贵金属盐催化剂存在下进行。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于：所述贵金属盐催化剂包括钯盐催化剂。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于：反应温度为85-110℃。

7.权利要求1或2所述的酰胺衍生物中性线粒体荧光标记物在制备线粒体荧光标记试剂中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于：所述线粒体荧光标记试剂靶向癌细胞的线粒体。

9.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，利用所述线粒体荧光标记试剂进行细胞成像的方法包括以下步骤：

将所述线粒体荧光标记试剂与细胞在37℃及5%CO₂条件下共培养10min以上，然后利用激光共聚焦显微镜进行细胞成像，收集荧光信号。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：当所述线粒体荧光标记试剂包括式（I）或式（II）所示的酰胺衍生物中性线粒体荧光标记物时，使用405nm光源激发，收集410～500nm范围内的荧光信号；

当所述线粒体荧光标记试剂包括式（III）或式（IV）所示的酰胺衍生物中性线粒体荧光标记物时，使用561nm光源激发，收集570～750 nm范围内的荧光信号。