[发明专利]利用化学发光检测羟基自由基的方法

权利要求书

1.一种利用化学发光检测羟基自由基的方法，包括以下步骤：

在羟基自由基产生反应体系中加入过量的探针分子香豆素，以使产生的羟基自由基与香豆素反应生成羟基化香豆素；

将生成羟基化香豆素的反应体系与过硫酸盐氧化体系混合注入化学发光检测池以实时检测产生的化学发光；

根据化学发光值确定所述羟基自由基产生反应体系中产生的羟基自由基的含量，包括利用标准曲线法将化学发光值转化为羟基自由基的浓度；

其中，建立标准曲线包括：通过调控Fe²⁺浓度利用经典Fenton反应产生不同剂量的羟基自由基，通过HPLC方法测定所述羟基自由基与香豆素反应后溶液中产生的7-羟基香豆素的浓度，根据所述7-羟基香豆素浓度和已知产率计算反应所产生的羟基自由基浓度，并利用构建的化学发光方法测定反应后溶液的化学发光值，进而建立化学发光值与羟基自由基浓度之间的线性方程。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述羟基自由基产生反应体系中所述香豆素的初始浓度为50-1000μmol/L。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述羟基自由基产生反应体系包括芬顿反应体系、类芬顿反应体系或光催化体系。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述将生成羟基化香豆素的反应体系与过硫酸盐氧化体系混合注入化学发光检测池的方式为注射法或动态在线检测法。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述过硫酸盐氧化体系为过硫酸盐或者过硫酸盐和双氧水的组合。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于，在将生成羟基化香豆素的反应体系与过硫酸盐氧化体系混合时还包括：加入pH调节剂对所述生成羟基化香豆素的反应体系的pH值进行调整。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：

在采用动态在线检测法的情况下，过硫酸盐的浓度为100-300mmol/L，双氧水的浓度为100-400mmol/L，NaOH浓度为1-2mol/L；

在采用注射法的情况下，以总体积5mL为例，NaOH浓度为100-1000mmol/L，过硫酸盐的浓度为20-60mmol/L，双氧水的浓度为20-80mmol/L。

8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：

所述注射法为分别将一预设体积的所述生成羟基化香豆素的反应体系通过手动或自动方式与过硫酸盐氧化体系混合，并实时测定化学发光；

所述动态在线检测法为采用连续流动进样的模式将所述生成羟基化香豆素的反应体系与过硫酸盐氧化体系混合，并实时测定化学发光。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述生成羟基化香豆素的反应体系为纯溶液体系或颗粒物悬浊液体系；

在所述生成羟基化香豆素的反应体系为颗粒物浓度大于1000mg/L的颗粒物悬浊液时，在将生成羟基化香豆素的反应体系与过硫酸盐氧化体系混合之前还包括：对所述生成羟基化香豆素的反应体系进行在线或离线过滤以去除颗粒物干扰。