[发明专利]一种多功能抗体的组合物

说明书

本发明涉及一种多功能抗体的稳定的药物组合物及其用途。具体而言，本发明涉及一种药物组合物，包含靶向PD‑1同时具有IL‑15/IL‑15Rα复合物的生物学效应的多功能抗体、磷酸氢二钠‑磷酸二氢钠缓冲液、表面活性剂、糖和氨基酸。本发明的药物组合物有较高的稳定性和PD‑1结合力。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及靶向PD-1同时具有IL-15/IL-15Rα复合物的生物学效应的多功能抗体的药物组合物。

背景技术

PD-1(程序性死亡蛋白-1)是由PDCD1基因编码的一个抑制性共刺激分子，由288个氨基酸残基组成的50-55kDa的I型跨膜糖蛋白，由细胞外IgV结构域、跨膜结构区域以及细胞内尾部结构三部分构成。它可表达于活化的T细胞、B细胞、NK细胞等单核细胞及树突状细胞(DCs)表面，提示PD-1在免疫调节中扮演着更关键的角色。PD-1作为表达在活化T细胞上的负性共刺激分子与肿瘤细胞表达的PD-L1结合，可抑制T细胞增殖，并促进活化T细胞的凋亡；而PD-1抗体则可以阻断PD-1/PD-L1的结合，使效应T细胞发挥其肿瘤杀伤作用。

细胞因子是一类在细胞通信中广泛使用的信号传导蛋白和糖蛋白，如激素和神经递质。虽然激素是由特定器官分泌到血液中，并且神经递质与神经活性有关，但是细胞因子为在其来源和用途方面更多样化类型的化合物。它们由多种造血细胞和非造血细胞类型产生，并可对邻近细胞或整个生物体都有作用，有时强烈地依赖于其它化学品的存在。细胞因子家族主要由质量为8至30kDa之间的较小的水溶性蛋白和糖蛋白组成。细胞因子对于天然免疫应答和适应性免疫应答的功能都重要。通常由已经遇到病原体的免疫细胞分泌，以作为活化和募集更多免疫细胞并增加系统对病原体反应的方式。

在细胞因子中，白细胞介素15(IL-15)是IL-2超家族的成员，其由很多细胞类型和组织(包括单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞(DC)、角质细胞、成纤维细胞和神经细胞)分泌。IL15被美国国家癌症中心列为最有潜力癌症免疫治疗药物，名列20个最有潜力肿瘤免疫治疗靶点和12个最有希望治愈肿瘤靶点第一位。研究表明IL-15可以有效的激活免疫系中CD8+T细胞、NK细胞和NK细胞的增殖和活化，而这三类细胞是肿瘤免疫中最重要的免疫细胞。

然而，细胞因子在临床上的使用存在着单药给药靶向性差的缺点，只有高浓度给药才可以达到抗肿瘤作用，而高浓度给药会产生免疫抑制作用和高毒性。并且，非靶向性细胞因子对于免疫系统的激活是系统性的，免疫系统被广泛的激活，具有致命的副作用。此外，由于细胞因子属于小分子量蛋白，不具备抗体的体内循环保护机制，单纯的细胞因子往往半衰期较短，需要短时间重复高剂量给药。目前临床研究药物多采用PEG化或者Fc融合来提高细胞因子的半衰期，虽然半衰期得以延长，但仍无法解决细胞因子的靶向性差的问题。

IL15Rα和IL-15均表达于DC细胞和单核细胞，IL15Rα的主要作用为与IL-15结合后，将结合的IL-15提呈给IL2Rβ和IL2Rγ，从而刺激免疫细胞的增殖和活化，因此IL-15活性的发挥依赖于IL-15Rα的提呈。但是静息状态下DC细胞IL-15Ra的表达水平很低，单独的给予患者IL-15治疗，临床效果有限，因而IL15/IL15Rα和IL15RαIgFc复合物的形成，解决了该问题。已有研究表明，IL15/IL15Rα复合物相比较于单纯的IL-15其生物学活性可以提高100倍，而与FC的融合则有效的延长了抗体的半衰期。

在现有技术中，CN110214147A和CN110214148A都公开了含有IL-15/IL-15Ra的融合蛋白，解决了短半衰期阻碍有利用药的问题。但是其公开的包含IL-15/IL-15Ra结构的抗体中，由于其结构复杂，仍有轻重链错配的问题，而且针对其相关的稳定性高的制剂并没有相关的研究。