[发明专利]一种高产谷胱甘肽毕赤酵母菌株G3-SA及其应用在审
申请号: | 202110011525.5 | 申请日: | 2021-01-06 |
公开(公告)号: | CN112646738A | 公开(公告)日: | 2021-04-13 |
发明(设计)人: | 许正宏;史劲松;徐国强;高宇豪;徐建国;付静;曹峥;吴勇杰 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/19 | 分类号: | C12N1/19;C12N15/52;C12N15/54;C12N15/81;C12N15/66;C12P21/02;C07K5/037;C12R1/84 |
代理公司: | 无锡承果知识产权代理有限公司 32373 | 代理人: | 张婷婷 |
地址: | 214122 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 高产 谷胱甘肽 酵母 菌株 g3 sa 及其 应用 | ||
1.一种高产谷胱甘肽毕赤酵母菌株G3-SA,其特征在于:以毕赤酵母为宿主,异源表达来源于酿酒酵母的谷胱甘肽合成酶Scgsh1和Scgsh2基因及腺苷激酶Scadk1基因,获得的工程菌命名为毕赤酵母菌株G3-SA。
2.根据权利要求1所述的高产谷胱甘肽毕赤酵母菌株G3-SA,其特征在于:所述毕赤酵母选用毕赤酵母Pichia pastoris GS115。
3.根据权利要求1所述的高产谷胱甘肽毕赤酵母菌株G3-SA,其特征在于:所述谷胱甘肽合成酶Scgsh1和Scgsh2基因、所述腺苷激酶Scadk1基因的核苷酸序列分别如SEQ.NO.01~SEQ.NO.03所示。
4.根据权利要求1所述的一种高产谷胱甘肽毕赤酵母菌株G3-SA的构建方法,其特征在于:以毕赤酵母为宿主,首先异源表达来源于酿酒酵母的谷胱甘肽合成酶Scgsh1、Scgsh2基因,获得的工程菌命名为G3;再以G3为宿主,异源表达来源于酿酒酵母的腺苷激酶Scadk1基因,获得的工程菌命名为毕赤酵母菌株G3-SA。
5.根据权利要求4所述的高产谷胱甘肽毕赤酵母菌株G3-SA的构建方法,其特征在于:具体方法为以pGAPZA为初始质粒,采用BglⅡ与BamHⅠ酶切,并将插入了XbaⅠ的片段插入其中,所构质粒命名为pGAPZT;在pGAPZT的BglⅡ与XbaⅠ之间插入PAOX1序列;Scadk1基因经S.cerevisiae BY4741基因组PCR扩增后获取,所得片段连接在pGAPZT中并用SacⅠ线性化电转至G3菌株中,所得菌株经含有2mg/L Zeocin的YPD平板筛选后,所得菌株名为G3-SA。
6.根据权利要求4所述的高产谷胱甘肽毕赤酵母菌株G3-SA的构建方法,其特征在于:所述腺苷激酶Scadk1基因的异源表达的发酵过程中,在发酵时间15-16h时外源添加4g/L的柠檬酸钠。
7.根据权利要求4所述的高产谷胱甘肽毕赤酵母菌株G3-SA的构建方法过程中得到的质粒。
8.编码如权利要求1-3任一所述的高产谷胱甘肽毕赤酵母菌株G3-SA的基因。
9.一种制备谷胱甘肽的方法,采用如权利要求1-3任一所述的高产谷胱甘肽毕赤酵母菌株G3-SA,或如权利要求4-6任一所述方法构建的高产谷胱甘肽毕赤酵母菌株G3-SA,通过发酵方法合成谷胱甘肽。
10.根据权利要求9所述方法制备得到的谷胱甘肽。
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