[发明专利]抗原、核酸、表达载体、抗原呈递细胞和细胞毒性T细胞及其应用

说明书

本发明涉及一种抗原、核酸、表达载体、抗原呈递细胞和细胞毒性T细胞及其应用。该抗原包括下述多肽片段或与下述多肽片段具有至少80％的序列同一性的多肽片段：A‑X1‑S‑K‑W‑V‑G‑K‑X2，其中，X1是L或M，X2是V、L或I。上述抗原可以诱导产生对肝癌细胞具有特异性杀伤的细胞毒性T细胞。

技术领域

本发明涉及免疫治疗技术领域，特别是涉及一种抗原、核酸、表达载体、抗原呈递细胞和细胞毒性T细胞及其应用。

背景技术

肝癌是目前全球第五大常见恶性肿瘤。肝癌的主要致病因素包括：乙型(HBV)和丙型(HCV)肝炎病毒的感染、饮酒过度和食用高脂食物过多诱发的肝硬化、和某些危险致癌物质和环境的感染等。早期肝癌没有明显症状，目前确诊的病例大多处于中晚期，且缺乏有效的治疗措施，预后效果极差。传统的肝癌治疗方法(例如手术切除、局部消融、放疗和化疗)具有较大的局限性：手术切除和局部消融后残留的癌细胞发生转移的概率大，复发率较高；放疗和化疗会严重损伤机体自身的正常细胞，对于中晚期患者很难达到较好的远期及预后疗效。因此，寻找更有效的肝癌治疗方法极为紧迫且具有重大的临床意义。

肿瘤免疫治疗是一种有可能彻底清除癌细胞的方法，弥补了传统疗法的弊端，被认为是二十一世纪肿瘤综合治疗模式中最有发展前途的一种治疗手段。2010年，肿瘤免疫疗法首次在黑色素瘤中大获成功。自此，针对免疫抑制分子PD-1、程序性细胞死亡-配体1(PD-L1)和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)的单克隆抗体相继获批上市。但研究发现在其他实体瘤中，例如中晚期肝癌，由于抗体治疗引发的免疫耐受以及肿瘤细胞内相关分子介导的复杂炎症信号通路等原因，其临床治疗效果并不理想。

发明内容

基于此，有必要提供一种抗原，以改善目前肝癌的治疗效果。

一种抗原，所述抗原包括下述多肽片段或与下述多肽片段具有至少80％的序列同一性的多肽片段：A-X1-S-K-W-V-G-K-X2，其中，X1是L或M，X2是V、L或I。

上述抗原能够诱导对肝癌细胞具有特异性杀伤的细胞毒性T细胞。通过该细胞毒性T细胞特异性杀伤肝癌细胞，可以改善目前肝癌的治疗效果。

一种核酸，含有用于编码上述的抗原的核酸序列。

在其中一个实施例中，所述核酸包含如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。

一种表达载体，包含上述的核酸。

一种抗原呈递细胞，由上述的抗原诱导具有抗原呈递能力的细胞得到。

在其中一个实施例中，所述具有抗原呈递能力的细胞为树突细胞。

一种细胞毒性T细胞的诱导剂，包括上述的抗原、上述的核酸、上述的表达载体或上述的抗原呈递细胞。

一种细胞毒性T细胞，经上述的抗原呈递细胞与T细胞在体外共培养得到。

上述的细胞毒性T细胞在制备治疗肝癌的药物中的应用。

一种用于治疗肝癌的药物，包括活性成分，所述活性成分包括上述的细胞毒性T细胞。

附图说明

图1为实施例1的EliSpot Assay的斑点结果；

图2为实施例1的EliSpot Assay的统计结果；

图3为实施例2中的置换效率的标准曲线；

图4为实施例2中的四聚体的流式结果；

图5为用四聚体检测实施例2中的用TPST1抗原刺激后的T细胞的流式结果；

图6为实施例3中的乳酸脱氢酶LDH杀伤实验的结果。

具体实施方式