[发明专利]一种CGF和脐带间充质干细胞外泌体混合物、制备及应用

说明书

本发明公开了一种CGF和脐带间充质干细胞外泌体混合物、制备方法及其在皮肤损伤修复中的应用，通过将脐带间充质干细胞外泌体作为“种子”组分、CGF同时作为“肥料”组分和“防腐剂”组分混合，以适当的方式导入受损皮肤组织中，共同作用于受损皮肤，对受损皮肤进行修复，通过CGF的“肥料”作用和“防腐剂”作用进一步充分发挥脐带间充质干细胞外泌体的“种子”作用，最终达到外泌体与CGF协同对受损皮肤的修复速度明显快于外泌体单独的修复速度的效果。

技术领域

本发明涉及干细胞技术领域，具体为一种CGF和脐带间充质干细胞外泌体混合物、制备方法及其在皮肤损伤修复中的应用。

背景技术

皮肤作为人体的最大器官，具有屏障、保护、调节体温和感觉的功能。由于炎症、溃疡、烫伤、烧伤等因素造成的皮肤缺损，严重的可危及生命。受损皮肤只有经过炎性细胞的趋化、肉芽组织的形成、局部成纤维细胞的增殖、角质形成细胞的迁移等几个步骤，才能顺利完成损伤修复，目前临床常见的治疗皮肤损伤方法主要是皮肤移植，但也让患者形成新的损伤。

众所周知，间充质干细胞是具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞，在一定条件下能分化成多种成体细胞，在促进皮肤损伤修复、减轻炎症反应、促进血管再生等方面有重要作用，其可作为重要的“种子”组分参与受损皮肤的修复再生。随着人们对间充质干细胞的深入研究，发现间充质干细胞对皮肤的修复是通过外泌体发挥作用的。外泌体(Exosome)是间充质干细胞释放至胞外环境中的囊泡类小体，直径约为30-150纳米之间，其内含有大量不同种类的蛋白质、脂类、DNA和RNA等，其中以微小核糖核酸(miRNA)为主，可存在于细胞培养上清液、血浆、血清、唾液、尿液、羊水和恶性腹水以及其它生物体液中，可以将脂类、碳水化合物、蛋白质、mRNA、miRNA和DNA等生物分子从一个细胞传递到另一个细胞，从而交换遗传信息、重编程宿主细胞，进行细胞间通讯。相关研究认为，人脐带间充质干细胞分泌的外泌体介导WNT4信号通路，在小鼠体内，介导的Wnt/b-连环蛋白活性在上皮形成和细胞增殖过程中发挥重要作用，参与皮肤损伤修复，而当外泌体Wnt4被敲除后，b-连环蛋白活性也消失，在体内的皮肤修复疗效也明显下降。

因此如何避免损伤已有的完整健康的皮肤，利用外泌体，充分发挥其“种子”作用，使受损皮肤尽快修复愈合，是本领域技术人员的努力方向。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何避免损伤已有的完整健康的皮肤，又充分利用外泌体，发挥其“种子”作用，使受损皮肤尽快修复愈合。

为解决上述问题，本发明提供了一种CGF和脐带间充质干细胞外泌体混合物，并将其应用在皮肤损伤的修复中。

一种CGF和脐带间充质干细胞外泌体混合物，所述混合物包括脐带间充质干细胞外泌体、CGF和磷酸盐溶液，所述的脐带间充质干细胞外泌体、CGF和磷酸盐溶液的体积比为2:(0.5～1):(2～4)。

CGF(Concentrate Growth Fact，浓缩生长因子)中富含有大量的生长因子及白细胞等生物活性成分。其中，生长因子在促进组织新生、再生及血管化等多个方面发挥着重要作用，可作为皮肤修复重要的“肥料”组分；白细胞在抗炎、抗感染等方面作用显著，可作为皮肤修复重要的“防腐剂”组分。通过将脐带间充质干细胞外泌体作为“种子”组分、CGF同时作为“肥料”组分和“防腐剂”组分混合，以适当的方式导入受损皮肤组织中，共同作用于受损皮肤，对受损皮肤进行修复，通过CGF的“肥料”作用和“防腐剂”作用进一步充分发挥脐带间充质干细胞外泌体的“种子”作用，最终达到外泌体与CGF协同对受损皮肤的修复速度明显快于外泌体单独的修复速度的效果。