[发明专利]一种用于恩诺沙星灵敏检测的光电化学适配体传感器的构建方法

权利要求书

1.一种用于恩诺沙星灵敏检测的光电化学适配体传感器的构建方法，其特征在于，步骤如下：

步骤1、溶剂热法制备溴化氧铋Bi₄O₅Br₂纳米片：

首先，溴化铋BiBr₃溶解在乙二醇中，搅拌下逐滴加入NaOH溶液，接着转入聚四氟乙烯高压釜中进行溶剂热反应，通过过滤洗涤离心回收固体产物，然后干燥获得Bi₄O₅Br₂纳米片；

步骤2、煅烧法制备氮杂溴化氧铋N-Bi₄O₅Br₂纳米复合物：

首先将步骤1制得的Bi₄O₅Br₂纳米片分别和不同质量的尿素均匀混合，在马弗炉中加热，得到的产物分别用二甲亚砜和蒸馏水洗涤干燥，获得不同掺杂含量的N-Bi₄O₅Br₂复合材料；

步骤3、构建灵敏检测恩诺沙星ENR的光电化学适配体传感器：

将步骤2制得的N-Bi₄O₅Br₂复合材料分散于N,N-二甲基甲酰胺DMF中，得到N-Bi₄O₅Br₂分散液，将分散液滴涂于ITO电极上，再滴涂壳聚糖CS溶液，烘干后将戊二醛GA溶液滴于电极表面，并置于室温下反应完毕后，用磷酸缓冲溶液PBS淋洗；将ENR适配体滴加在电极上，反应一段时间后，用PBS淋洗，然后滴加牛血清蛋白BSA溶液，最终得到适配体修饰的材料电极，即用于恩诺沙星检测的光电化学适配体传感器。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤1中，所述BiBr₃与NaOH溶液的用量比为1.33g：12.6mL，其中，NaOH溶液的浓度为2mol/L；所述溶剂热反应的温度为140～160℃，反应时间为10～12h；离心速率为8000～9000rmp/s，离心时间为6～8min；干燥温度为50～60℃，干燥时间为10～12h。

3.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤2中，所述N-Bi₄O₅Br₂中氮的质量百分含量为10％～50％；马弗炉设置温度为200～220℃，反应时间为3～5h。

4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤3中，所述N-Bi₄O₅Br₂分散液为2mg/mL；所述CS浓度为0.1％；GA浓度为2.5％，CS溶液的用量为10μL，GA溶液的用量为20μL，CS与GA反应时间为0.5～1h。

5.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤3中，ENR适配体序列为：5′-NH₂-CCC ATC AGG GGG CTA GGC TAA CAC GGT TCG GCT CTC TGA GCC CGG GTT ATT TCA GGGGGA-3′；ENR适配体浓度为3μM，滴加量为20μL，反应时间10h；BSA浓度为3％；所述PBS浓度为0.1mol/L,pH＝7.4，用量为10～20mL。

6.将权利要求1～5任一项所述构建方法构建的光电化学适配体传感器用于检测恩诺沙星的用途。

7.根据权利要求6所述的用途，其特征在于，将不同浓度的ENR溶液滴到用于恩诺沙星检测的光电化学适配体传感器上，并孵育一段时间，以ITO电极作为工作电极，饱和甘汞电极作为参比电极，铂丝作为对电极，经过电化学工作站三电极系统，在氙灯光源的照射下按浓度依次进行光电分析。

8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于，ENR浓度分别为0.1～10⁸ng/mL，滴加量为10～20μL；孵育温度为37℃；氙灯光源的强度为25％～100％。