[发明专利]基于双发射镧系MOF的碱性磷酸酶检测试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种基于双发射镧系MOF的碱性磷酸酶检测试剂盒，其特征在于，包括酶解反应底物、酶激活剂和双发射镧系MOF，所述双发射镧系MOF与所述酶解反应底物以及酶激活剂分开存放，所述双发射镧系MOF的配体和镧系离子分别具有特征蓝色荧光和特征绿色荧光；所述酶解反应底物为可被碱性磷酸酶水解的磷酸酯钠，所述酶激活剂为二价镁离子盐；所述双发射镧系MOF的有机配体为3,3',5,5'-联苯四甲酸，所述镧系离子为 铽盐。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述双发射镧系MOF的配体和镧系离子的蓝色荧光的峰强度以及绿色荧光的峰强度比值为（10:1）~（1:10）。

3.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述酶解反应底物、酶激活剂、双发射镧系MOF的用量比为（50-800）nmol：（50-300）nmol：（50-300）mg。

4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括离心管和独立的分装盒，所述酶解反应底物以及酶激活剂置于所述离心管底部，所述双发射镧系MOF置于所述分装盒内。

5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述离心管的上部可拆卸连接有超滤内管，所述超滤内管的一端通过毛细孔连通离心管内部，另一端固定有可取出的玻璃纤维试纸。

6.如权利要求1~5任一项所述基于双发射镧系MOF的碱性磷酸酶检测试剂盒在碱性磷酸酶活性分析领域的应用。

7.一种基于镧系MOF的碱性磷酸酶检测方法，其特征在于，步骤如下：

（1）将酶解反应底物、酶激活剂以及Tris-甘氨酸缓冲液、待测血清混匀；

（2）将所得混合液置于恒温摇床中，在温度20-37℃条件下进行酶解反应；

（3）酶解反应完毕后，向混合液中加入双发射镧系MOF，再次混匀，所述双发射镧系MOF的配体和镧系离子分别具有特征蓝色荧光和特征绿色荧光；所述酶解反应底物为可被碱性磷酸酶水解的磷酸酯钠，所述酶激活剂为二价镁离子盐；所述双发射镧系MOF的有机配体为3,3',5,5'-联苯四甲酸，所述镧系离子为 铽盐；

（4）检测混合液的荧光信号，根据特征蓝色荧光和特征绿色荧光的变化分析得到待测血清中磷酸酶含量。

8.如权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述检测混合液荧光信号的方法包括：a，直接荧光光谱仪检测；b，转染后在紫外光下利用RGB提取软件辅助进行肉眼可视化检测。