[发明专利]一种能够防治丹参根腐病的贝莱斯芽孢杆菌及其应用

说明书

一种能够产生防治丹参根腐病的贝莱斯芽孢杆菌，该菌株编号为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)D2XJ，已保藏于已保藏于“中国典型培养物保藏中心”(简称CCTCC)，保藏地址：湖北省武汉市，洪山区八一路，武汉大学中国典型培养物保藏中心，登记入册的保藏号为CCTCC M 2020927，保藏日期为2020年12月21日。本发明的贝莱斯芽孢杆菌对丹参根腐病病原菌均具有良好的抑制作用，对丹参根腐病病害的防效能达到35％以上，能够有效降低丹参根腐病的发病率，其效果优于现有的常用化学农药。本发明筛选的贝莱斯芽孢杆菌使用后不会产生抗药性、农药残留、环境污染等化学农药常见问题，对人畜健康、环境友好，符合人们对生态农业的需求。

技术领域

本发明涉及一种能够防治丹参根腐病的贝莱斯芽孢杆菌及其应用，属于微生物技术领域。

背景技术

丹参Salvia miltiorrhizaBge为唇形科多年生草本，以干燥根和根茎入药，是治疗心脑血管疾病的首选药物之一。近年来，种植丹参已经成为河南省豫西贫困山区脱贫攻坚和乡村振兴的重要举措。为了保证丹参的产量，多数药材种植户在丹参的种植过程中广泛使用化学肥料和化学药剂，一定程度上降低了丹参的品质，严重情况下还会出现肥害和药害，甚至导致化学制剂残留超标，同时对种植区的生态环境也造成了污染。利用有益拮抗菌开展生物防治和土壤调控，是当前倍受关注的研究热点。目前，主要依靠微生物这种生物方式来防治植物病害，包括细菌、真菌和放线菌等。丹参根腐病是丹参生产中最重要的病害，严重降低了丹参的产量。研究发现，对丹参威胁最大的根腐病病原菌主要包括镰刀属的层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)、腐皮镰刀菌(F.solani)、尖孢镰刀菌(F.oxysporum) 及细极链格孢(Alternaria tenuissima)。生物防治在丹参根腐病病害控制方面已经受到学者的重视，有关丹参根腐病病原菌F.solani的生防菌筛选及其菌剂和应用已被广泛研究，已公开生防菌株主要有枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、木霉等几类，而对病原菌F.proliferatum、F.oxysporum及链格孢属Alternaria sp有效的生防菌较少，因此筛选对丹参根腐病不同病原菌同时有效的生防菌株具有重要的理论和实践意义。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种能够产生防治丹参根腐病的贝莱斯芽孢杆菌，以及该菌种的筛选方法和应用，该贝莱斯芽孢杆菌能够防治丹参根腐病。

本发明未解决上述技术问题所采用的技术方案是：

一种能够产生防治丹参根腐病的贝莱斯芽孢杆菌，该菌株编号为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)D2XJ，已保藏于已保藏于“中国典型培养物保藏中心”(简称CCTCC)，保藏地址：湖北省武汉市，洪山区八一路，武汉大学中国 典型培养物保藏中心，登记入册的保藏号为CCTCC M 2020927，保藏日期为2020 年12月21日。

所述的一种能够产生防治丹参根腐病的贝莱斯芽孢杆菌，其筛选方法为：在丹参田采集丹参根际土壤，称取1g土壤，加入10ml无菌水中充分振荡获得土壤悬浮液，然后将土壤悬浮液摇匀后进行稀释，取0.2ml稀释液涂布于LB固体平板上，培养，至菌落长出后分离纯化，然后利用平板拮抗试验筛选出对丹参根腐病具有抑制效果的菌株，并鉴定，得到贝莱斯芽孢杆菌D2XJ。

所述的一种能够产生防治丹参根腐病的贝莱斯芽孢杆菌，其在防治丹参根腐病方面的应用。

所述的一种能够产生防治丹参根腐病的贝莱斯芽孢杆菌，其在制备防治丹参根腐病的菌剂中的应用。

所述的菌剂的制备方法为：将贝莱斯芽孢杆菌D2XJ接种于LB培养基中，在28℃、180rpm条件下振荡培养12h制备种子菌，种子菌以2％的接种量接种于LB培养基中，在28℃、180rpm条件下发酵48h，形成发酵液，即为菌剂。

所述的发酵液中贝莱斯芽孢杆菌D2XJ活菌的浓度为10⁷～10⁸CFU/mL。