[发明专利]一种利用日本曲霉PJ01产酶降解西番莲果皮多糖的制备方法及应用在审
申请号: | 202110025376.8 | 申请日: | 2021-01-08 |
公开(公告)号: | CN112877381A | 公开(公告)日: | 2021-06-01 |
发明(设计)人: | 李霞;孙永进;单杨;李培骏;关媛 | 申请(专利权)人: | 桂林理工大学 |
主分类号: | C12P19/04 | 分类号: | C12P19/04;C08B37/00;C12R1/66 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 541004 广*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 日本 曲霉 pj01 降解 西番莲 果皮 多糖 制备 方法 应用 | ||
1.一种利用日本曲霉PJ01产酶降解西番莲果皮多糖的制备方法,其特征在于具体步骤为:
(1)取新鲜西番莲果皮洗净,50℃烘干,粉碎,在85℃条件下,按照料液比1:20g/mL加入80%的乙醇冷凝回流提取3次,每次2h,过滤,残渣干燥,即得去除色素、酚类的西番莲果皮粉末;
(2)称取1g步骤(1)制得的西番莲果皮粉末,按照料液比1:27g/mL的比例加入蒸馏水,微波提取3min,过滤,3000rpm离心10min,取上清液浓缩,即得到浓缩液;
(3)取步骤(2)制得的浓缩液加入4倍体积的无水乙醇,混匀,静置48h,4000rpm离心15min,取沉淀冷冻干燥,获得水提西番莲果皮多糖;
(4)以日本曲霉PJ01为实验菌株,接种于PDA斜面上培养;挑取长势较好的单菌落纯化,活化2次,接种斜面保存,即得活化后的菌种;
(5)将步骤(4)活化后的菌种接种于PDA固态发酵培养基,于30℃恒温培养箱中培养3天,以1:20(w:v)的比例加蒸馏水浸泡固态发酵产酶的发酵底物,在170rpm,40℃的条件下在振荡培养箱反应2h,获得粗酶液;
(6)按1:200(w:v)的比例将步骤(3)获得的水提西番莲果皮多糖与步骤(5)获得的粗酶液混合,于45℃水浴锅溶解,然后转入振荡培养箱中,在45℃,170rpm条件下水解6h,最后沸水浴5min以终止反应,浓缩,冷冻干燥,得到酶解西番莲果皮多糖。
2.根据权利要求1所述的制备方法制备的酶降解后西番莲果皮多糖的应用,其特征在该酶解西番莲果皮多糖应用于抗氧化类保健品与化妆品。
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