[发明专利]一种舞花姜组织培养快速繁殖方法

说明书

本发明公开了一种舞花姜组织培养快速繁殖方法。本发明以舞花姜优良株系的未开放的幼嫩花蕾为外植体，通过外植体的获得和消毒、愈伤组织的诱导和增殖、愈伤组织的脱分化、不定芽继代增殖、生根培养和试管苗移栽等等阶段，选择适合各培养阶段的培养基配方和培养条件，实现舞花姜种苗的规模化繁殖，繁育出优质的舞花姜种苗满足市场的需要。本发明技术简单实惠，切实可行，应用价值高。实施该发明只需有简单的植物组织培养设备即可进行。

技术领域：

本发明属于植物组织培养技术领域，具体涉及一种舞花姜组织培养快速繁殖方法。

背景技术：

舞花姜(Globba winitti)又名威尼替舞花姜、美苞舞花姜、泰国舞花姜等，原产泰国。为多年生草本植物，具有花序独特、花期长、抗病性强等优点，可做切花、盆栽或园林观赏。我国近年来从泰国引进，价格较贵，主要采用分株繁殖，繁殖速度慢。利用植物组织培养技术能有效地解决这个问题，但以舞花姜的地下根状茎为外植体时，污染率高。

目前，国内外还没有舞花姜组织培养种苗繁殖的报道。

发明内容：

本发明的目的是克服现有技术中的不足，提供一种舞花姜组织培养快速繁殖方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种舞花姜组织培养快速繁殖方法，包括以下步骤：

(a)外植体的获得和消毒方法：在生长季节选取生长旺盛、无病虫害危害的舞花姜(Globba winitti)的幼嫩花蕾作为外植体，经消毒处理后，接入愈伤组织诱导培养基中培养，培养温度24-30℃，光照度1500-2500lx，光照12-16小时/天，外植体产生愈伤组织，所述的愈伤组织诱导培养基每升含有：6-苄基嘌呤0.2-1.0毫克、2,4-二氯苯氧乙酸1.0-3.0毫克、蔗糖20-30克、琼脂6-7克，余量为MS培养基，pH 5.8-6.0；

(b)愈伤组织的增殖：将步骤(a)获得的愈伤组织接种到愈伤组织增殖培养基中进行愈伤组织的增殖，培养温度24-30℃，光照度1500-2500lx，光照12-16小时/天，所述的愈伤组织增殖培养基每升含有：2,4-二氯苯氧乙酸0.5-1.0毫克、蔗糖20-30克、琼脂6-7克，余量为MS培养基，pH 5.8-6.0；

(c)愈伤组织的脱分化：将步骤(a)或步骤(b)获得的愈伤组织转移到愈伤组织脱分化培养基中培养，培养温度24-30℃，光照度1500-2500lx，光照12-16小时/天，愈伤组织脱分化形成体细胞胚，所述的愈伤组织脱分化培养基每升含有：噻苯隆0.5-1.5毫克、蔗糖20-30克、琼脂6-7克，余量为MS培养基，pH 5.8-6.0，将体细胞胚转移到不定芽诱导培养基中培养，培养温度24-30℃，光照度1500-2500lx，光照12-16小时/天，体细胞胚分化成不定芽，所述的不定芽诱导培养基每升含有：噻苯隆0.05-0.15毫克、蔗糖20-30克、琼脂6-7克，余量为MS培养基，pH 5.8-6.0；

(d)不定芽继代增殖：将诱导出的不定芽切割成单芽后再继代培养于不定芽继代增殖培养基中进行不定芽的增殖，培养温度24-30℃，光照度1500-2500lx，光照12-16小时/天，所述的不定芽继代增殖培养基每升含有：6-苄基嘌呤1.0-2.0毫克、萘乙酸0.1-0.3毫克、蔗糖20-30克、琼脂6-7克，余量为MS培养基，pH 5.8-6.0；

(e)生根培养：当继代增殖的不定芽芽高2-3厘米高时，切下接种到生根培养基上进行生根培养，培养温度24-30℃，光照度1500-2500lx，光照12-16小时/天，所述的生根培养基每升含有：萘乙酸0.5-1.0毫克、蔗糖20-30克、琼脂6-7克，余量为1/2MS培养基，pH5.8-6.0；

(f)试管苗移栽：当生根培养得到的试管苗长至4-5厘米高时，在自然光照下炼苗，然后洗掉试管苗根部培养基，栽入栽培基质中，浇水遮荫，保温保湿，由此得到舞花姜种苗。