[发明专利]从褐藻中提取高纯度岩藻聚糖硫酸酯的方法有效
申请号: | 202110032610.X | 申请日: | 2021-01-12 |
公开(公告)号: | CN112679627B | 公开(公告)日: | 2022-10-21 |
发明(设计)人: | 武龙;唐世英;周慧;汪秋宽;任丹丹;何云海;杨贺琪;刘思歧;董秀瑜;张曦文 | 申请(专利权)人: | 大连海洋大学 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00 |
代理公司: | 大连非凡专利事务所 21220 | 代理人: | 闪红霞 |
地址: | 116000 辽宁*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 褐藻 提取 纯度 聚糖 硫酸 方法 | ||
1.一种从褐藻中提取高纯度岩藻聚糖硫酸酯的方法,其特征在于依次按照如下步骤进行:
(1)将新鲜的褐藻洗净50~60℃烘干,搅碎成粉末过50~60目筛,得到褐藻粉;
(2)将pH为4.8的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液加入褐藻粉中,边加边搅拌,得到溶液I,所述褐藻粉质量与柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液体积比为1g:15~20ml;
(3)将溶液I升温至48~50℃,加入复合酶酶解1~2h,得到溶液II,所述复合酶是将纤维素酶和β-葡萄糖苷酶按照体积比为1:4~6混合制成,其中,纤维素酶制剂的蛋白质含量为157.61mg/ml;滤纸酶活为17.19FPU/ml,内切纤维素酶活为6.27CMCU/ml,纤维二糖酶活为8.75CBU/ml;β-葡萄糖苷酶制剂的蛋白质含量为4.5mg/ml;滤纸酶活为3.39FPU/ml,内切纤维素酶活为8.59CMCU/ml,纤维二糖酶活为91.66CBU/ml;复合酶的加入量为每100g褐藻粉添加滤纸酶活61.5~75.06 FPU、内切纤维素酶活81~115.64 CMCU 及纤维二糖酶活750.8~1117.34CBU;
(4)将溶液II升温至95~100℃,进行热水抽提3~5h,得到溶液III;
(5)将溶液III在4500~5000r/min下离心15min,得到上清液I;
(6)向上清液I中加入体积浓度为90~100%的乙醇至终浓度为20~30%,4500~5000r/min离心15min,得到上清液II;
(7)向上清液II中加入体积浓度为90~100%的乙醇至终浓度为60~70%,4500~5000r/min离心15min,得到沉淀I;
(8)将沉淀I用5~6倍体积的水溶解,加入体积浓度为90~100%的乙醇至终浓度为20~30%,4500~5000r/min离心15min,得到上清液III;
(9)向上清液III中加入体积浓度为90~100%的乙醇至终浓度为60~70%,4500~5000r/min离心15min,得到沉淀II;
(10)将沉淀II用无水乙醚清洗后冷冻干燥,得到产品。
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